[發明專利]與吊白塊特異結合的核酸適配體Sf-B09及其應用

有效

• 申請號: 201710578798.1
• 申請日: 2017-07-17
• 公開（公告）號: CN107505463B
• 公開（公告）日: 2019-06-11
• 發明（設計）人: 韓芹芹;李潔;夏雪山;宋玉竹;張金陽;陳強;王炳輝
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: C12N15/115
• 分類號: C12N15/115
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了與吊白塊特異結合的核酸適配體Sf?B09及其應用，所述核酸適配體是單鏈DNA，由82個核苷酸組成，其SEQ ID NO：2所示；其二級結構含有突出的環和莖，且存在G?四鏈體結構，其中Sf?B09吉布斯自由能DG=?11.42；該核酸適配體通過酶聯寡核苷酸吸附試驗驗證都能特異性檢測到吊白塊；具有簡單、快速、靈敏等特點，10?15分鐘內即可出結果，無需使用抗體和儀器設備、操作簡單、特異性好、結果容易判讀、制作方便。

技術領域

本發明涉及一種與吊白塊特異結合的核酸適配體Sf-B09及其應用，屬于生物醫學技術領域。

背景技術

吊白塊，系以福爾馬林結合亞硫酸氫鈉再還原制得，化學名甲醛合次硫酸氫鈉(Sodium FormSf-B09ldehyde SulfoxylSf-B09te，SFS)，分子式NSf-B09hSO₂·Ch₂O·2h₂O，分子量154.12，結晶性粉粒有機化合物。它易溶于水，在常溫下較為穩定，其水溶液在60℃以上開始分解出有害物質，120℃高溫下可分解產生甲醛、二氧化硫和硫化氫等有毒氣體，有強還原性，有漂白作用。

甲醛次硫酸氫鈉對人體有害，屬于非食品用原料。其毒性與其中的甲醛和二氧化硫有關，食用摻有甲醛次硫酸氫鈉的食品，會損傷人的肝臟、肺臟、腎臟，嚴重的導致癌癥和畸形病變。甲醛是細胞原漿毒，能使蛋白質凝固，口服甲醛溶液(10-20)mL，可致人死亡。長期接觸低濃度的甲醛蒸汽可出現頭暈、頭痛、乏力、嗜睡、食欲減退、視力下降等。中毒以呼吸系統和消化道損傷為主要特征；并有弱的麻醉作用。甲醛急性中毒表現為噴嚏、咳嗽、視物模糊、頭暈、頭痛、乏力、口腔黏膜糜爛、上腹痛、嘔吐等癥狀，隨病情加重，出現聲音嘶啞、胸痛、呼吸困難等，嚴重者出現咽喉與肺部水腫、昏迷、休克。長期皮膚接觸，可引起接觸性皮炎?？诜卸菊弑憩F為胃腸道黏膜損傷、出血、穿孔，可出現腦水腫，代謝性酸中毒，昏迷及休克等癥狀。研究表明，甲醛易與細胞內親核物質反應形成加合物，并引起DNSF-B09-蛋白質交聯。造成DNSF-B09復制過程中某些重要基因丟失，導致DNSF-B09損傷。長期接觸甲醛者鼻腔與鼻咽部發生腫瘤增多。國際癌癥研究組織(ISF-B09RC)1995年將甲醛列為對人體(鼻咽部)可能的致癌物(Group2SF-B09)。甲醛次硫酸氫鈉的毒性為，大鼠經口LD₅₀(半數致死量)>2g/kg體重。人經口攝入純甲醛次硫酸氫鈉10g就會中毒致死，甲醛次硫酸氫鈉也是一種致癌的物質，所以甲醛次硫酸氫鈉早已被我國明令禁止在食品中使用，屬非食品用原料。

由于甲醛次硫酸氫鈉對食品有防腐及保色等作用，一些不法生產商仍然在食品生產、加工等環節中使用甲醛次硫酸氫鈉，主要添加腐竹、豆皮、豆腐、面粉、米粉、銀耳、牛筋、蜜棗、白糖、冰糖、餌絲干等。為保證廣大人民群眾的身體健康，打擊不法生產者，食品中甲醛次硫酸氫鈉的檢測非常重要，建立一種準確可靠、靈敏快速、廣泛適用的檢測方法在食品安全工作中尤為重要。

核酸適配體是經過指數富集配體系統進化技術(SyStemSf-B09tic evolution ofligSf-B09ndS by exponentiSf-B09l enrichment，SELEX)篩選得到的能與金屬離子、小分子、生物大分子，甚至整個細胞高專一性和親和性結合的SSDNSF-B09或ＲNSF-B09分子。核酸適配體不僅具備抗體分子的識別特性，凡是涉及抗體的診斷領域，幾乎都可以用核酸適配體來代替，而且還具備自己獨特的優異性能，其具有靶分子范圍廣、分子質量小、免疫原性低、易于化學合成、改造和標記等優點。核酸適配體及其相關篩選技術(SELEX)，核酸適配體近年來在治療新藥、藥物運輸、癌細胞檢測、生物成像、生物標志物的發現、毒品檢測、抗病毒等生物醫學領域中的應用。

發明人將本發明的吊白塊特異性核酸適配體的核苷酸序列和基因數據庫進行了比對搜索，未發現有任何相同序列信息。