[發(fā)明專利]一種以文冠果成熟胚為外植體的不定芽誘導(dǎo)方法

有效

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• 申請日: 2017-07-14
• 公開（公告）號: CN107223567B
• 公開（公告）日: 2019-07-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王美珍;張文軍;趙穎;黃衛(wèi)麗
• 申請（專利權(quán)）人: 內(nèi)蒙古自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01C1/00
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• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明一種以文冠果成熟胚為外植體的不定芽誘導(dǎo)方法，其特征在于：首先將文冠果成熟胚作為外植體進行處理與消毒，消毒完畢后即可接種在事先配制好的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為MS+6?BA1.0mg/L+TDZ 0.05mg/L+NAA0.01mg/L；第三步將消毒后的種子，在超凈工作臺上進行無菌操作，將大子葉的先端用消毒手術(shù)刀切除，將大子葉背面朝下接種在事先配制好的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進行誘導(dǎo)；接種完成后，暗培7天，轉(zhuǎn)至光照時間為13h，光照強度為2000?3000lux，溫度為25±2℃，空氣濕度為30?40％的條件下培養(yǎng)。采用以上方法可使文冠果成熟胚的分化率達到77.5％。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種不定芽誘導(dǎo)方法，尤指一種以文冠果成熟胚為外植體的不定芽誘導(dǎo)方法。

背景技術(shù)

文冠果無患子科、文冠果屬落葉灌木或小喬木，高可達5米；小枝褐紅色粗壯，葉連柄長可達30厘米；小葉對生，兩側(cè)稍不對稱，頂端漸尖，基部楔形，邊緣有銳利鋸齒，兩性花的花序頂生，雄花序腋生，直立，總花梗短，花瓣白色，基部紫紅色或黃色，花盤的角狀附屬體橙黃色，花絲無毛；蒴果長達6厘米；種子黑色而有光澤。春季開花，秋初結(jié)果。

分布中國北部和東北部，西至寧夏、甘肅，東北至遼寧，北至內(nèi)蒙古，南至河南。野生于丘陵山坡等處，各地也常栽培。

文冠果耐干旱、貧瘠、抗風(fēng)沙，在石質(zhì)山地、黃土丘陵、石灰性沖積土壤、固定或半固定的沙區(qū)均能成長，是中國特有的一種食用油料樹種。

文冠果具有較高的工業(yè)價值和營養(yǎng)價值，油脂成份在種子和種仁中含量極高。研究結(jié)果證明：種仁中含油量達66.39％，優(yōu)良品種的種仁中含油量達72％，超過一般的油料植物，其油脂的基本組成如下：硬脂酸、油酸38.9％(一般食用油的主要成份之一)、亞油酸40.2％(和豆油、核桃油相近，也是營養(yǎng)價值最高的部分)，山崳酸7.2％、亞麻酸及甘碳烯酸各為0.3％。文冠果是我國特有的經(jīng)濟木本油料樹種，油黃色而透明，食用味美，油中所含亞油酸是中藥益壽寧的主要成份，具有極好降血壓作用，食用文冠果油可有效預(yù)防高血壓、高血脂、血管硬化等病癥。此外，文冠果種仁除可加工食用油外，還可制作高級潤滑油、高級油漆、增塑劑、化妝品等工業(yè)原料。由文冠果籽油制備的生物柴油相關(guān)烴脂類成分含量高，內(nèi)含18C的烴類占93.4％，而且無S、無N等污染環(huán)境因子，符合理想生物柴油指標(biāo)。文冠果的柴油提取已獲成功，陜西、河南、甘肅、北京等國內(nèi)地區(qū)已在積極籌建文冠果油大中型加工廠，日本、韓國、加拿大等國也紛紛建造文冠果園林基地及加工廠。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明一種以文冠果成熟胚為外植體的不定芽誘導(dǎo)方法的目的是提供一種提高文冠果成熟胚分化率的方法。

本發(fā)明一種以文冠果成熟胚為外植體的不定芽誘導(dǎo)方法所采用的技術(shù)手段是：首先配制誘導(dǎo)培養(yǎng)基，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為MS+6-BA1.0mg/L+TDZ 0.05mg/L+NAA0.01mg/L；之后將文冠果成熟胚作為外植體進行處理與消毒；第三步將消毒后的種胚在超凈工作臺上進行無菌操作，將大子葉的先端用消毒手術(shù)刀切除，將大子葉背面朝下接種在事先配制好的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進行誘導(dǎo)；接種完成后，暗培7天后，轉(zhuǎn)至光照時間為13h，光照強度為2000-3000lux，溫度為25±2℃，空氣濕度為30-40％的條件下培養(yǎng)。

對文冠果成熟胚作為外植體進行處理與消毒的步驟為：首先將文冠果種子用中性洗滌劑飽和液浸泡10min，同方向攪拌，然后用清水沖洗干凈，再用清水浸泡15h；然后用0.5％濃度高錳酸鉀溶液消毒10min，不斷攪拌，用清水沖洗干凈，再用75％酒精浸泡30s，用清水沖洗3-5遍；再次用75％酒精浸泡和擦拭剪刀和燒杯等工具和器皿，用消毒后的剪刀輕輕剝?nèi)シN皮，剝完后，將完整的種胚放入消毒后的燒杯中，用流水沖洗1h；最后接種前，要在超凈工作臺上，再用70％酒精浸泡胚10s，用無菌水沖洗3遍；然后用0.1％濃度升汞溶液(HgCl₂)進行消毒，消毒時間為5min，同方向搖晃，用無菌水沖洗5遍，每次保持1min。