[發明專利]一種以文冠果成熟胚為外植體的不定芽誘導方法有效
| 申請號: | 201710578552.4 | 申請日: | 2017-07-14 |
| 公開(公告)號: | CN107223567B | 公開(公告)日: | 2019-07-26 |
| 發明(設計)人: | 王美珍;張文軍;趙穎;黃衛麗 | 申請(專利權)人: | 內蒙古自治區林業科學研究院 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00;A01C1/00 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 010020 內蒙古自*** | 國省代碼: | 內蒙古;15 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 成熟胚 文冠果 外植體 消毒 不定芽誘導培養基 接種 不定芽誘導 子葉 配制 光照 誘導培養基 無菌操作 手術刀 分化率 背面 切除 配方 誘導 | ||
1.一種以文冠果成熟胚為外植體的不定芽誘導方法,其特征在于:首先配制誘導培養基,所述誘導培養基的配方為MS+ 6-BA1.0mg/L+TDZ 0.05mg/L +NAA0.01mg/L;之后將文冠果成熟胚作為外植體進行處理與消毒;第三步將消毒后的種胚在超凈工作臺上進行無菌操作,將大子葉的先端用消毒手術刀切除,將大子葉背面朝下接種在事先配制好的不定芽誘導培養基中進行誘導;接種完成后,暗培7天后,轉至光照時間為13h,光照強度為2000lux,溫度為25±2℃,空氣濕度為30-40%的條件下培養;
所述處理與消毒的步驟為:首先將文冠果種子用中性洗滌劑飽和液浸泡10min,同方向攪拌,然后用清水沖洗干凈,再用清水浸泡15h;然后用0.5%濃度高錳酸鉀溶液消毒10min,不斷攪拌,用清水沖洗干凈,再用75%酒精浸泡30s,用清水沖洗3-5遍;再次用75%酒精浸泡和擦拭剪刀和燒杯,用消毒后的剪刀輕輕剝去種皮,剝完后,將完整的胚放入消毒后的燒杯中,用流水沖洗1h;最后接種前,要在超凈工作臺上,再用70%酒精浸泡胚10s,用無菌水沖洗3遍;然后用0.1%濃度升汞溶液進行消毒,消毒時間為5min,同方向搖晃,用無菌水沖洗5遍,每次保持1min。
2.根據權利要求1所述的一種以文冠果成熟胚為外植體的不定芽誘導方法,其特征在于:文冠果種子用中性洗滌劑主要成分是烷基磺酸鈉和脂肪醇醚硫酸鈉。
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