[發明專利]一種鑒別黃姑魚遺傳性別的分子標記及其應用

有效

• 申請號: 201710576187.3
• 申請日: 2017-07-14
• 公開（公告）號: CN107326077B
• 公開（公告）日: 2020-02-21
• 發明（設計）人: 王志勇;李完波;孫莎
• 申請（專利權）人: 集美大學
• 主分類號: C12Q1/6879
• 分類號: C12Q1/6879;C12N15/11
• 代理公司: 廈門市精誠新創知識產權代理有限公司 35218
• 代理人: 方惠春

本發明公開了一種鑒別黃姑魚遺傳性別的分子標記及其應用。所述分子標記表現為SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的插入/缺失長度多態性；具有SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的個體，表現為雌性黃姑魚；缺失SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的個體，表現為雄性黃姑魚。本發明還公開了檢測所述分子標記的引物對、試劑盒、及方法。本發明的分子標記可以簡便、快速、穩定地鑒別出黃姑魚各個群體中不同個體的遺傳性別，利于開發黃姑魚的單性育種技術，發展黃姑魚單性養殖，進一步提高養殖效益，增加黃姑魚養殖的經濟收益。同時也將有益于黃姑魚性別決定機制等相關的科學研究的開展。

技術領域

本發明涉及水產生物技術領域中的魚類遺傳性別鑒定和性別控制技術，具體涉及一種鑒別黃姑魚遺傳性別的分子標記及其應用。

背景技術

在生命科學研究領域，性別研究一直是一個熱點命題，吸引著眾多研究者的關注。魚類在動物進化中處于承前啟后的地位，且物種數量豐富。同大多數脊椎動物類似，不少魚類也是雌雄異體，具有性別二態性，在形態和生理上表現出顯著的雌雄兩性差異。而且，一些魚類物種的個體生長等重要經濟性狀及經濟價值與性別密切相關；因而開發這些魚類的單性育種與養殖技術在魚類養殖產業上具有很大的意義。許多魚類盡管存在這種生長的性別二態性，但雌雄魚在外部形態上卻沒有顯著差異，尤其是在性腺尚未發育成熟時，其性別往往難以區分；還有一些魚類存在天然的性反轉現象，或者可以通過人工轉性改變其生理性別，但性別反轉或改變前后沒有形態上的差異，無法通過外部形態識別其遺傳性別。這些問題的存在給單性育種、養殖及相關的遺傳學基礎研究帶來很大的困擾，尤其性別決定分子機制研究。因此，針對這些魚類物種開發可以準確鑒定其遺傳性別的分子標記，對于進行這些魚類的單性育種與遺傳學研究，提高魚產量、增加水產養殖收益以及促進相關的研究有著重要的意義。

黃姑魚(Nibea albiflora)隸屬脊索動物門、脊椎動物亞門、硬骨魚綱、鱸形目、石首魚科、黃姑魚屬，分布于我國和日本沿海，兼具食用和藥用價值。黃姑魚具有顯著的雌雄生長二態性，雌魚生長速度顯著快于雄魚，開發其單性育種與單性養殖技術具有重要的產業意義。但在性腺發育成熟之前，黃姑魚的雌魚和雄魚卻很難從外部形態上加以區分，胚胎和幼體階段雌雄魚形態上完全沒有區別；不存在異形性染色體，也無法從細胞學角度鑒定其遺傳性別；這給其單性育種技術的開發帶來了很大困難。因此，開發一種可以鑒別其遺傳性別的分子標記用于黃姑魚性別控制育種具有極大的生產應用價值。

隨著分子生物學技術的發展，目前已有多種類型的DNA分子標記被開發出來，其中主要包括：(1)限制性片段長度多態性(Restriction Fragment Length Polymorphism，RFLP)；(2)隨機擴增多態性DNA(Random Amplification Polymorphism DNA，RAPD)；(3)擴增片段長度多態性(Amplified Fragment Length polymorphism，AFLP)；(4)微衛星標記(microsatellite)，又稱為短串聯重復序列(Short Tandem Repeats，STRs)或簡單重復序列(Simple Sequence Repeat，SSR)；(5)單核苷酸多態性(Single NucleotidePolymorphism，SNP)。利用上述DNA分子標記技術，已經有許多物種的性別特異的分子標記被開發出來，但不同物種其基因組DNA序列結構不同，沒有一個物種的性別特異分子標記可以被用于對其他物種的遺傳性別進行鑒定，只能針對不同物種分別進行開發。

迄今為止，可以識別與鑒定(鑒別)黃姑魚遺傳性別的分子標記國內外都還沒有見到報道。

發明內容

成年黃姑魚的雌性個體顯著大于雄性個體，這使得雌性黃姑魚在消費市場中更具有競爭優勢。為使該經濟性狀在人工培育中達到最大化，提高該物種的水產養殖收益，本發明提供了一種識別與鑒定黃姑魚遺傳性別的分子標記方法，有助于快速、簡便、準確鑒別黃姑魚遺傳性別，為順利開展黃姑魚的性別控制育種工作、發展單性養殖建立基礎。