[發明專利]新品種半滑舌鰨的分子選育方法

有效

• 申請號: 201710574005.9
• 申請日: 2017-07-14
• 公開（公告）號: CN107287323B
• 公開（公告）日: 2020-10-27
• 發明（設計）人: 薛致勇;李超;魯翠云;孫效文;鄭先虎;程磊;毛成全
• 申請（專利權）人: 海陽市黃海水產有限公司;中國水產科學研究院黑龍江水產研究所
• 主分類號: C12Q1/686
• 分類號: C12Q1/686;G16B5/00;G16B40/10
• 代理公司: 煙臺雙聯專利事務所(普通合伙) 37225
• 代理人: 梁翠榮

本發明公開了新品種半滑舌鰨的分子選育方法，它解決了目前半滑舌鰨養殖和培育中，種內雜交方法隨機性大，選育優良品種的概率低，群體選育方法存在易產生近親交配，導致經濟性狀和生產性能下降的問題。選育步驟：一、挑選表型性狀；二、檢測分析雌雄親本間的遺傳組成；三、選擇位于不同繁殖系譜的親本，以親本間的遺傳距離0.7～1.0作為“閾值”范圍進行配組；四、培育子代至性成熟；五、以子代半滑舌鰨為新一代親本，重復操作步驟一至四，直到達到新品種半滑舌鰨性狀的設計要求。本發明方法在選育新品種半滑舌鰨的過程中，始終檢測各代親本的繁殖譜系，以各代親本間的遺傳距離0.7～1.0作為“閾值”范圍進行配組，從而既能避免近親交配，又能按照所設定的方向選擇半滑舌鰨新品種的性狀，顯著提高其經濟性狀和生產性能，增加優良新品種的出現概率。

技術領域：

本發明涉及一種魚類新品種的選育方法，尤其涉及一種新品種半滑舌鰨的分子選育方法。

背景技術：

半滑舌鰨是我國海水養殖的主導魚類之一，具有個體大、生長快、肉味鮮美等特點，經濟價值很高。目前常用的育種方法以種內雜交和群體選育為主，由于在育種前不了解選育親本的遺傳信息，同時種內雜交隨機性大，選育優良品種的概率低，群體選育容易使親本近親交配，會出現種質退化現象，以致出現了孵化率、出苗率降低、生長速度減慢、抗逆性差等性狀退化現象，使半滑舌鰨經濟性狀和生產性能下降。

發明內容：

本發明的目的是為解決目前半滑舌鰨養殖和培育過程中，種內雜交方法隨機性大，選育優良品種的概率低，群體選育方法存在易產生近親交配，出現種質退化，導致經濟性狀和生產性能下降的問題，針對上述問題提供的一種新品種半滑舌鰨的選育方法。

本發明的目的可以通過如下措施來達到：新品種半滑舌鰨的分子選育方法，其特征在于新品種半滑舌鰨按以下步驟選育：

一、根據新品種的設計需求，挑選表型性狀符合要求的半滑舌鰨作為親本，表型性狀挑選公式為，公式中Xn為親本的表型性狀測定值，為半滑舌鰨群體表型性狀的平均值，S為半滑舌鰨群體表型性狀的標準差；

二、檢測分析親本間的遺傳組成，a.提取親本基因組DNA；b.用20對微衛星標記引物對親本基因組DNA分別進行PCR擴增；c.將PCR擴增產物進行凝膠電泳檢測，獲得產物條帶圖片；d.利用凝膠圖像分析軟件，將PCR擴增產物電泳條帶圖片轉化成數字信息數據；e.將數字信息數據導入遺傳分析軟件，計算獲得親本間的遺傳組成；

三、根據遺傳組成，選擇親本間的遺傳距離0.7～1.0作為“閾值”范圍進行配組，親本分成2個或2個以上繁殖群體；

四、繁殖群體內親本自由組合交配，生產、培育子代半滑舌鰨至性成熟；

五、以子代半滑舌鰨為新一代親本，重復操作步驟一至四，直到達到新品種半滑舌鰨性狀的設計要求，即得到新品種半滑舌鰨。

為了進一步實現本發明的目的，所述的第二步驟的步驟a中提取親本基因組DNA采用常規酚-氯仿抽提的方法或者使用基因組DNA純化試劑盒。

為了進一步實現本發明的目的，所述的第二步驟的步驟b中每對微衛星標記引物的PCR擴增反應總體積為15L，包括10.8L反應緩沖液、100ng親本個體基因組DNA、0.6μL微衛星標記上下游引物、0.5U TaqDNA聚合酶和余量的滅菌超純水；其中反應緩沖液含有終濃度10 mmol/L Tris-Cl（pH 8.3）、50 mmol/L KCl、1.5 mmol/L MgCl₂、200 μmol/L dNTP和余量的超純水。

為了進一步實現本發明的目的，所述的第二步驟的步驟b中PCR擴增反應程序為：94℃預變性3分鐘；94℃變性30秒，58℃復性30秒，72℃延伸30秒，循環25次；最后72℃延伸5分鐘。