[發明專利]常溫保存核酸標本的方法及其產品與使用方法

有效

• 申請號: 201710573403.9
• 申請日: 2017-07-14
• 公開（公告）號: CN107254467B
• 公開（公告）日: 2020-02-14
• 發明（設計）人: 李坤
• 申請（專利權）人: 北京朗閱科技有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 11514 北京酷愛智慧知識產權代理有限公司
• 代理人: 安娜

本發明涉及一種常溫保存核酸標本的方法及其產品與使用方法，常溫保存核酸標本的方法包括如下步驟：將二氧化硅微珠、氧化鋯微珠和碳鋼微珠用酸清洗，然后等個數混合，放在容器中；將核酸標本溶液加入容器中，混勻后干浴或干燥；將得到的樣本室溫干燥保存，即可。本發明提供的常溫保存核酸標本的方法，以二氧化硅材質、氧化鋯材質和和碳鋼的微珠的表面為載體，利用核酸在高鹽狀態下，能與二氧化硅類物質親和吸附，以及在干燥狀態下能長期保存的特點，常溫長期保存核酸；直接保存DNA、新鮮或固定液處理過的細胞，均可以實現對核酸的長期保存，且保存效果好，保存方法簡單。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及一種常溫保存核酸標本的方法及其產品與使用方法。

背景技術

隨著分子生物學檢測技術的飛速發展，核酸的檢測在各種領域發揮會著重要的作用。在檢測的同時，也有大量的核酸標本需要被保存。這些保存下來的核酸有可能用于科學研究，或者隨著科技的進步發揮更大的作用。

常見的核酸包括DNA和RNA，其中DNA比較穩定，可長期保存；RNA極不穩定，若想長期保存需逆轉錄成cDNA，多數實驗室只保存3～6個月。

目前，保存核酸樣本多采用低溫凍存的方法，比如低溫冰箱(多為-30℃或-80℃)、冷庫或者液氮保存，這樣做看似順理成章，但是實際中還是存在一些可探討的問題：

第一，低溫保存首先需要占用大量的冰箱，很占空間，其次不管是冰箱還是冷庫，都需要大量的耗電，這既是經濟負擔，又是能源負擔，還是環保負擔；

第二，用液氮保存核酸的報道比較少，因為液氮屬于消耗品，需要經常補充，這就使得這種保存方法的價格相對昂貴，而且還存在一定的安全隱患；

第三，DNA雖然很穩定，但是隨著時間的推移其自身也在不斷發生著降解，多數報道的理論上限是十年。RNA則更加明顯，提取操作中稍有不慎，保存3個月都很困難。

但是，如果分析核酸的理化性質和降解酶的活性就不難發現，其在完全被干燥的狀態下，可以延長核酸的保存時間，甚至被長期保存。比如有文獻報道，在70年代用FTA卡保存的人的全血樣本中(干血片)，有人提取了RNA并成功進行了下游實驗；還有報道，由于條件的限制，在非洲檢測HIV病毒(一種RNA病毒)的常規方法是用FTA卡保存血液樣本，干燥后運輸到本地實驗室檢測進行檢測；DNA效果更佳，尼安德特人基因的提取并測序，甚至是從恐龍化石中提取DNA都已經不是新聞。類似的報道很多，這些都說明一個問題，即使是不純(和其它物質混合在一起的狀態)，只要是在完全被干燥的狀態下，核酸就能被長期常溫保存。那么如果是比較純的核酸呢，則結果未知。因此，還需要開發新型的保存核酸的方法。

發明內容

針對現有技術中的缺陷，本發明目的在于提供一種常溫保存核酸標本的方法及其產品與使用方法，以通過采用二氧化硅材質、氧化鋯材質和和碳鋼的微珠的表面為載體，利用核酸在高鹽狀態下，能與二氧化硅類物質親和吸附，以及在干燥狀態下能長期保存的特點，常溫長期保存核酸；直接保存DNA、新鮮或固定液處理過的細胞，均可以實現對核酸的長期保存，且保存效果好，保存方法簡單。

為實現上述目的，本發明提供的技術方案為：本發明提供了一種常溫保存核酸標本的方法，包括如下步驟：S1：將二氧化硅微珠、氧化鋯微珠和碳鋼微珠用酸清洗，然后等個數混合，放在容器中；S2：將核酸標本溶液加入容器中，混勻后干浴或干燥；S3：將S2得到的樣本室溫干燥保存，即可。需要說明的是，三種微珠均要進行酸洗，這樣做的目的有三：(1)可以去除珠子表面的核酸，實現無核酸；(2)增加表面的粗糙感，增加附著力；(3)先使玻璃珠帶上正電荷，抵消隨后的負電，增強吸附性。

在本發明的進一步實施方式中，S1中，二氧化硅微珠、氧化鋯微珠和碳鋼微珠的個數均為10個，容器為1.5mL離心管或形狀相似的容器。需要說明的是，將三種微珠共30個(1:1:1)，放在1.5ml離心管或形狀相似的容器中，這樣珠子數量和體積剛好，有利于水分的蒸發。