[發明專利]一種測定飼料中淀粉糊化度的方法

在審

• 申請號: 201710571222.2
• 申請日: 2017-07-13
• 公開（公告）號: CN107478644A
• 公開（公告）日: 2017-12-15
• 發明（設計）人: 張杏莉;吳海英;傅興震;周盛昌;張書金;周通;楊偉春;吳有林
• 申請（專利權）人: 漳州傲農牧業科技有限公司;廣州傲農生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司31225
• 代理人: 王小榮

技術領域

本發明屬于淀粉糊化度測定技術領域，涉及一種測定飼料中淀粉糊化度的方法。

背景技術

淀粉在常溫下不溶于水，但當水溫升高至53℃以上時，淀粉的物理性質會發生明顯變化。淀粉在高溫下溶脹、分裂形成均勻糊狀溶液的過程，稱為淀粉的糊化。未經糊化的淀粉分子，其結構呈微晶束定向排列，這種淀粉結構狀態為β型；通過蒸煮或擠壓，達到物化溫度時，淀粉充分吸水膨脹，以致微晶束解體，排列混亂，這種淀粉結構狀態為α型。淀粉結構狀態由β型轉化為α型的過程即為淀粉的糊化，也稱為α化。通俗地說，淀粉的糊化就是由生變熟的過程。在糧食食品、飼料的生產中，由于淀粉的糊化程度高低會影響復水時間，進而影響食品或飼料的品質，因而常常需要了解產品中淀粉的糊化程度，即由生變熟的程度。

淀粉糊化度是表示淀粉糊化程度的指標，是指淀粉中的糊化淀粉占全部淀粉量的百分比，淀粉糊化度會直接影響畜禽吸收利用飼料中能量物質的效率，從而影響畜禽的生長性能。因此，測定飼料中的淀粉糊化度非常重要。快速準確地測定飼料中的淀粉糊化度，進而監控膨脹玉米、熟化玉米等原料及配合料的品質，能夠為原料的采購和驗收提供參考數據，同時對飼料品質的安全性具有重要意義。

目前，尚未有對飼料中淀粉糊化度進行測定的國家標準，而各企業對淀粉糊化度的測定方法各不相同，常用的淀粉糊化度測定方法主要有分光光度計法及滴定法。其中，分光光度計法在加入磷鉬酸試劑時，易受到加樣速度的影響，導致最終生成的物質易沉淀，進而對分光光度計的比色結果影響較大，并且對操作者的要求較高，操作難度較大；而滴定法需準確判定滴定終點，同樣對操作者的要求較高，不利于推廣應用。

發明內容

本發明的目的就是為了克服上述現有技術存在的缺陷而提供一種操作簡便且重復性好的測定飼料中淀粉糊化度的方法。

本發明的目的可以通過以下技術方案來實現：

一種測定飼料中淀粉糊化度的方法，該方法具體包括以下步驟：

1)將待檢測的飼料樣品粉碎后篩分，得到試樣；

2)取3個容器，向其中2個容器中加入等量試樣，分別作為全糊化樣品及待測定樣品，另一個容器作為空白樣品；

3)分別向全糊化樣品、待測定樣品及空白樣品中加入緩沖液，并混合均勻；

4)將全糊化樣品置于沸水浴中加熱0.5-1.5h，之后冷卻至室溫；

5)分別向全糊化樣品、待測定樣品及空白樣品中加入酶溶液，并于35-45℃下加熱0.5-1.5h；

6)分別向全糊化樣品、待測定樣品及空白樣品中加入硫酸溶液，并混合均勻；

7)分別向全糊化樣品、待測定樣品及空白樣品中加入鎢酸鈉溶液，混合均勻后靜置，并過濾去除沉淀；

8)分別向全糊化樣品、待測定樣品及空白樣品中加入3,5-二硝基水楊酸試劑，混合均勻后，置于沸水浴中加熱3-8min，冷卻后進行比色測定，并計算得到淀粉糊化度。

步驟1)中，所述的試樣的粒徑小于0.425mm。

步驟1)中，所述的試樣先用石油醚或乙醚洗滌，除去試樣中的脂肪，之后再用乙醇洗滌，除去試樣中的可溶性糖類。若試樣中含有較多脂肪及可溶性糖類，通過增加此處理步驟，能夠除去試樣中的脂肪及可溶性糖類；對于一般的玉米加工副產物來說，可省略此處理步驟。

步驟2)中，所述的容器為具塞比色管。

步驟3)中，所述的緩沖液為冰醋酸-乙酸鈉緩沖液，該冰醋酸-乙酸鈉緩沖液中，CH₃COONa的質量濃度為1-1.2g/mL。也可將冰醋酸-乙酸鈉緩沖液的pH值調整至4.5±0.05。

步驟5)中，所述的酶溶液為葡萄糖淀粉酶溶液，該葡萄糖淀粉酶溶液的制備過程為：將葡萄糖淀粉酶溶于緩沖液中，并置于振蕩器上振蕩7-12min，之后過濾去除沉淀即可；每1mL緩沖液中，加入0.005-0.015g葡萄糖淀粉酶。葡萄糖淀粉酶中，以酶活力8萬U，酶用量1000-1600U/g為準，若酶的活力降低，則酶用量按比例相應加大。

步驟6)中，所述的硫酸溶液為硫酸-水溶液，該硫酸-水溶液中，H₂SO₄的體積百分含量為8-12％；步驟7)中，所述的鎢酸鈉溶液為鎢酸鈉-水溶液，該鎢酸鈉-水溶液中，鎢酸鈉的質量濃度為10-15g/mL。硫酸溶液能夠使試樣中的蛋白質變性，鎢酸鈉溶液能夠使變性的蛋白質沉淀下來，形成更穩定化合物。