[發(fā)明專(zhuān)利]一種配方奶/乳粉中低聚果糖總量的檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710569902.0
• 申請(qǐng)日: 2017-07-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107449840A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-12-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張書(shū)芬;李湘江;邢家溧;畢曉麗;沈堅(jiān);應(yīng)璐;周子焱;張愛(ài)芝;張少華;章銀珠
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 寧波市食品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 寧波奧圣專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙)33226
• 代理人: 程曉明

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及低聚果糖總量的檢測(cè)方法，尤其是涉及一種配方奶/乳粉中低聚果糖總量的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

低聚果糖是一種天然活性物質(zhì)，具有調(diào)節(jié)腸道菌群，增殖雙歧桿菌，促進(jìn)鈣吸收，調(diào)節(jié)免疫，抗齲齒等功能，是可溶性膳食纖維的重要組成部分，由于其良好的性能被普遍添加于配方食品及輔助食品中。如作為營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑，GB14880-2012標(biāo)準(zhǔn)中明確規(guī)定了其在嬰幼兒配方食品中使用的最大限量不超過(guò)64.5g/kg。

目前的文獻(xiàn)研究表明低聚果糖的檢測(cè)手段主要為液相色譜法和離子色譜法。其大都采用了以蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖為低聚果糖的主要成分，采用外標(biāo)法進(jìn)行定量的方式。考慮到低聚果糖主要有兩種來(lái)源，一種是以蔗糖為原料，利用果糖基轉(zhuǎn)移酶的催化作用轉(zhuǎn)化而成的，主要成分含蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖。一種是以菊苣或菊芋為原料，經(jīng)酶解或酸解而生成的聚合度為2-9的果聚糖。僅以三種低聚果糖的量來(lái)代表低聚果糖總量，這對(duì)于添加了以菊苣或菊粉為來(lái)源的低聚果糖的產(chǎn)品的檢測(cè)顯然是不合適的。

2017年3月1號(hào)實(shí)施的國(guó)標(biāo)GB5009.255-2016標(biāo)準(zhǔn)是專(zhuān)門(mén)針對(duì)食品中果聚糖的檢測(cè)方法，能夠有效檢測(cè)低聚果糖的總量，但該方法需要用離子色譜儀配以三元及以上梯度泵和脈沖安培檢測(cè)器的進(jìn)行檢測(cè)，由于使用的設(shè)備價(jià)格昂貴達(dá)百萬(wàn)人民幣以上，且三元及以上梯度泵和脈沖安培檢測(cè)器專(zhuān)用性強(qiáng)，適用范圍小，因此限制了該標(biāo)準(zhǔn)方法的推廣應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種能夠利用現(xiàn)有的通用設(shè)備，適于推廣應(yīng)用的配方奶/乳粉中低聚果糖總量的檢測(cè)方法。

本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案為：一種配方奶/乳粉中低聚果糖總量的檢測(cè)方法，包括以下步驟：

1)制備果糖標(biāo)準(zhǔn)溶液并進(jìn)行高效液相色譜法—蒸發(fā)光檢測(cè)器檢測(cè)，得到標(biāo)準(zhǔn)譜圖；

2)將步驟1獲得的標(biāo)準(zhǔn)譜圖制作成果糖濃度與色譜峰面積關(guān)系曲線(xiàn)圖；

3)對(duì)待檢測(cè)的配方奶/乳粉樣品進(jìn)行預(yù)處理得到待測(cè)樣液；

4)然后使用高效液相色譜法—蒸發(fā)光檢測(cè)器對(duì)步驟3)得到的待測(cè)樣液進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)得色譜峰面積，其中色譜條件為：

a)色譜柱：安捷倫ZORBAX Carbohydrate糖分析柱，5.0μm，4.6×150mm；

b)進(jìn)樣量：20～50μL；

c)柱溫：30～50℃；

d)流動(dòng)相流速：0.8～1.0mL/min；

5)根據(jù)步驟2)的關(guān)系曲線(xiàn)圖，得到配方奶/乳粉樣品的水解果糖含量；

6)根據(jù)以下?lián)Q算公式得到配方奶/乳粉中低聚果糖的總量：

式中：

X—配方奶/乳粉中低聚果糖的總量，單位為克/每千克(g/kg)；

K₁—對(duì)果聚糖水解過(guò)程中增加的水分子進(jìn)行校正；

K₂—對(duì)于Fn型果聚糖末端果糖基被還原和GFn型果聚糖末端葡萄糖不被檢測(cè)進(jìn)行校正；

C—待測(cè)樣液中果糖的質(zhì)量濃度,單位為毫克每升(mg/L)；

C₀—未加樣品的空白測(cè)定液中果糖的質(zhì)量濃度,單位為毫克每升(mg/L)；

V—待測(cè)樣液定容體積,單位為毫升(mL)；

V₁—待測(cè)樣液酶解液定容體積，單位為毫升(mL)；

m—待測(cè)樣液質(zhì)量，單位為克(g)；

0.2—用于酶解的樣品溶液體積，單位為毫升(mL)；

1000—單位轉(zhuǎn)換系數(shù)；

n—平均聚合度，對(duì)于低聚果糖，按照n＝4計(jì)算。

步驟1)和步驟2)的具體內(nèi)容為：

稱(chēng)取低聚果糖標(biāo)準(zhǔn)品并用蒸餾水逐級(jí)稀釋?zhuān)謩e稀釋成至少5種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，將不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行高效液相色譜法—蒸發(fā)光檢測(cè)器檢測(cè)并得到標(biāo)準(zhǔn)譜圖，測(cè)定相應(yīng)的色譜峰面積值，其中色譜條件為：

a)色譜柱：安捷倫ZORBAX Carbohydrate糖分析柱，5.0μm，4.6×150mm；

b)進(jìn)樣量：20～50μL；

c)柱溫：30～50℃；

d)流動(dòng)相流速：0.8～1.0mL/min；

以標(biāo)準(zhǔn)工作液中果糖的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，以色譜峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得到果糖濃度與色譜峰面積關(guān)系曲線(xiàn)圖，果糖濃度與色譜峰面積的對(duì)應(yīng)函數(shù)關(guān)系。

步驟3)的具體內(nèi)容為：