[發明專利]一種配方奶/乳粉中低聚果糖總量的檢測方法

在審

• 申請號: 201710569902.0
• 申請日: 2017-07-13
• 公開（公告）號: CN107449840A
• 公開（公告）日: 2017-12-08
• 發明（設計）人: 張書芬;李湘江;邢家溧;畢曉麗;沈堅;應璐;周子焱;張愛芝;張少華;章銀珠
• 申請（專利權）人: 寧波市食品檢驗檢測研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務所(普通合伙)33226
• 代理人: 程曉明

1.一種配方奶/乳粉中低聚果糖總量的檢測方法，其特征在于包括以下步驟：

1)制備果糖標準溶液并進行高效液相色譜法—蒸發光檢測器檢測，得到標準譜圖；

2)將步驟1獲得的標準譜圖制作成果糖濃度與色譜峰面積關系曲線圖；

3)對待檢測的配方奶/乳粉樣品進行預處理得到待測樣液；

4)然后使用高效液相色譜法—蒸發光檢測器對步驟3)得到的待測樣液進行檢測，測得色譜峰面積，其中色譜條件為：

a)色譜柱：安捷倫ZORBAX Carbohydrate糖分析柱，5.0μm，4.6×150mm；

b)進樣量：20～50μL；

c)柱溫：30～50℃；

d)流動相流速：0.8～1.0mL/min；

5)根據步驟2)的關系曲線圖，得到配方奶/乳粉樣品的水解果糖含量；

6)根據以下換算公式得到配方奶/乳粉中低聚果糖的總量：

式中：

X—配方奶/乳粉中低聚果糖的總量，單位為克/每千克(g/kg)；

K₁—對果聚糖水解過程中增加的水分子進行校正；

K₂—對于Fn型果聚糖末端果糖基被還原和GFn型果聚糖末端葡萄糖不被檢測進行校正；

C—待測樣液中果糖的質量濃度,單位為毫克每升(mg/L)；

C₀—未加樣品的空白測定液中果糖的質量濃度,單位為毫克每升(mg/L)；

V—待測樣液定容體積,單位為毫升(mL)；

V₁—待測樣液酶解液定容體積，單位為毫升(mL)；

m—待測樣液質量，單位為克(g)；

0.2—用于酶解的樣品溶液體積，單位為毫升(mL)；

1000—單位轉換系數；

n—平均聚合度，對于低聚果糖，按照n＝4計算。

2.如權利要求1所述的一種配方奶/乳粉中低聚果糖總量的檢測方法，其特征在于步驟1)和步驟2)的具體內容為：

稱取果糖標準品并用蒸餾水逐級稀釋，分別稀釋成至少6種不同濃度的標準溶液，將不同濃度的標準溶液進行高效液相色譜法—蒸發光檢測器檢測并得到標準譜圖，測定相應的色譜峰面積值，其中色譜條件為：

a)色譜柱：安捷倫ZORBAX Carbohydrate糖分析柱，5.0μm，4.6×150mm；

b)進樣量：20～50μL；

c)柱溫：30～50℃；

d)流動相流速：0.8～1.0mL/min；

以標準工作液中果糖的質量濃度為橫坐標，以色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得到果糖濃度與色譜峰面積關系曲線圖，果糖濃度與色譜峰面積的對應函數關系。

3.如權利要求1所述的一種配方奶/乳粉中低聚果糖總量的檢測方法，其特征在于步驟3)的具體內容為：

準確稱取一定量的配方奶/乳粉于容器中，加入80℃熱水約50mL，置于80℃±1℃恒溫水浴搖床中，150r/min振搖15min后,冷至室溫轉移定容至50mL容量瓶中，作為樣液；

若配方奶/乳粉為含蔗糖配方奶/乳粉，取300μL樣液，加入0.10-0.80mL蔗糖酶(5.0U/mL)溶液，旋渦振蕩混勻，置于40℃±1℃恒溫水浴搖床中，150r/min振搖60min后，按照0.8-1.5倍將硼氫化鈉溶液加入樣液，繼續振搖30min后取出，冷卻至室溫后按照2-3倍加入乙酸溶液，靜置10min，隨后加入0.5-1.5mL果聚糖酶溶液(500U/mL)，旋渦振蕩混勻，于40℃±1℃恒溫水浴搖床中，150r/min振搖30min后，冷卻至室溫后定容至2.5ml，過0.22μm水相微孔濾膜待測；

若配方奶/乳粉為不含蔗糖配方奶/乳粉，取300μL樣液于具塞玻璃試管中，加入0.5-1.5mL果聚糖酶酶解后定容至2.5ml待測。

4.如權利要求3所述的一種配方奶/乳粉中低聚果糖總量的檢測方法，其特征在于蔗糖酶的加入量為0.5mL，果聚糖酶的加入量為1.0mL。

5.如權利要求1所述的一種配方奶/乳粉中低聚果糖總量的檢測方法，其特征在于步驟4)中流動相為乙睛70～85：水30～15，增益值為5.0以上。

6.如權利要求5所述的一種配方奶/乳粉中低聚果糖總量的檢測方法，其特征在于流動相為乙睛85：水15，PMT增益值為8.0。