[發明專利]檢測環境中甾體類激素的光學生物傳感器的制備方法及應用

在審

• 申請號: 201710569026.1
• 申請日: 2017-07-13
• 公開（公告）號: CN107505309A
• 公開（公告）日: 2017-12-22
• 發明（設計）人: 郭瑞;潘琳;于源華;張昊;宮平;張曉
• 申請（專利權）人: 長春理工大學
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76
• 代理公司: 長春眾益專利商標事務所(普通合伙)22211
• 代理人: 紀尚

1.一種檢測環境中甾體類激素的光學生物傳感器的制備方法，其方法是：

1）利用共價偶聯技術將親和素固定至石英光纖的底端，然后將能夠與甾體類激素發生特異性結合反應的生物素修飾的dsDNA包被于親和素表面，作為傳感器的傳感膜；

2）將傳感器的傳感膜放入到不含有甾體類激素以及激素結合蛋白的樣品孔中，用于觀察探針的穩定性，作為下一步反應的基線；

3）然后將傳感器置于不同濃度的含有甾體類激素以及激素結合蛋白的樣品孔中，未與激素結合的蛋白就會與探針表面固定的特異性分子發生結合反應；

4）隨后將傳感器重新置于被測分子的稀釋溶液中，激素結合蛋白與探針表面固定的特異性分子發生解離反應；

5）對每個濃度的結合解離曲線進行分析獲得對應的親和常數。

2.如權利要求1所述的一種檢測環境中甾體類激素的光學生物傳感器的制備方法，其方法是：

1）通過共價交聯法，將具有信號放大效應的鏈霉親和素（SA）蛋白固定到光纖探針制備生物親和性檢測SA光纖探針，使得光纖探針能夠與生物素標記的特異的DNA序列結合；

2）通過退火的形式，對合成的單鏈DNA進行復性，獲得生物素標記的雙鏈DNA；

3）將得到的Biothin-dsDNA OP1再進行倍比稀釋，分別固定于光纖探針SA表面，光纖探針表面dsDNA自組裝達到飽和狀態，光譜響應信號不再變化，得到最佳的包被濃度；

4）將生物素修飾的光纖探針固定至Biothin-dsDNA OP1，檢測最大響應信號的相對標準偏差；

5）將梯度稀釋的的睪丸酮標準品與RepA提前孵育，然后將制備好的光纖探針插入到樣品孔中，通過儀器對干涉光譜進行監測，若光譜出現漂移，則證明環境中存在甾體類激素。

3.一種檢測環境中甾體類激素的光學生物傳感器的應用，其應用是：檢測環境中甾體類激素的技術利用白光干涉生物分子相互作用檢測系統對環境中甾體類激素含量做出判斷。