[發明專利]一種高爾基銀染神經組織的冰凍切片方法有效
| 申請號： | 201710568588.4 | 申請日： | 2017-07-13 |
| 公開（公告）號： | CN107271241B | 公開（公告）日： | 2018-07-31 |
| 發明（設計）人： | 劉鐳;楊昭云;李卉;魏稼黎;鐘峰;戴如平 | 申請（專利權）人： | 中南大學湘雅二醫院 |
| 主分類號： | G01N1/28 | 分類號： | G01N1/28;G01N1/30 |
| 代理公司： | 長沙朕揚知識產權代理事務所(普通合伙) 43213 | 代理人： | 何湘玲;周孝湖 |
| 地址： | 410004 *** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 高爾基 神經 組織 冰凍 切片 方法 | ||
1.一種高爾基銀染神經組織的冰凍切片方法，包括以下步驟：
(1)將質量體積比濃度均為4％～6％的重鉻酸鉀、氯化汞和鉻酸鉀水溶液按照體積比1:(0.8～1.2):(0.8～1.2)的比例混合，得高爾基銀染溶液；
(2)將待染色的神經組織浸泡在高爾基銀染溶液中，其中神經組織與高爾基銀染溶液的體積比為1：(4～6)，避光放置，浸泡12h～24h，然后更換高爾基銀染溶液，繼續浸泡7天～14天；
(3)將浸泡后的神經組織置于含甘油10％～20％V/V、含蔗糖15％～20％W/V的甘油-蔗糖混合溶液中進行脫水；
(4)利用冰凍切片機將脫水后的神經組織進行切片。
2.根據權利要求1所述的高爾基銀染神經組織的冰凍切片方法，其特征在于，所述步驟(4)中，對神經組織進行切片后，將切片置于明膠包被的載玻片上，放置過夜，然后將放置過夜的切片依次進行氨水顯影、硫代硫酸鈉分化、梯度酒精脫水、二甲苯透明和中性樹脂封片。
3.根據權利要求1所述的高爾基銀染神經組織的冰凍切片方法，其特征在于，所述步驟(3)中，所述脫水的時間為24h～72h。
4.根據權利要求1所述的高爾基銀染神經組織的冰凍切片方法，其特征在于，所述步驟(4)中，所述神經組織為腦組織，所述冰凍切片機的切片溫度為-18℃～-23℃。
5.根據權利要求1所述的高爾基銀染神經組織的冰凍切片方法，其特征在于，所述步驟(4)中，所述切片的厚度為100μm～200μm。
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