[發明專利]一種缺陷性分支桿菌以及利用其制備去氫表雄酮的方法在審
| 申請號： | 201710565607.8 | 申請日： | 2017-07-12 |
| 公開（公告）號： | CN107267418A | 公開（公告）日： | 2017-10-20 |
| 發明（設計）人： | 陽飛;蘇正定;賀一君;系祖斌;盧方欣;張華山;成細瑤 | 申請（專利權）人： | 湖北共同生物科技有限公司;湖北工業大學 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;C12P33/06;C07J1/00;C12R1/32 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 442700 湖北省十堰市丹江*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 缺陷 分支 桿菌 以及 利用 制備 去氫表雄酮 方法 | ||
1.一種缺陷性分支桿菌，其特征在于，其為3β-羥基氧化酶系缺陷性分支桿菌，保藏號為：CCTCC NO：M 2017348。
2.根據權利要求1所述的一種缺陷性分支桿菌，其特征在于，所述3β-羥基氧化酶系缺陷性分支桿菌由誘變株Mycobacterium sp.GTF-69篩選獲得。
3.根據權利要求2所述的一種缺陷性分支桿菌，其特征在于，所述3β-羥基氧化酶系由CRISPAR/CAS9基因敲除方法敲除。
4.一種利用權利要求1～3所述缺陷性分支桿菌制備去氫表雄酮的方法，其特征在于，其包括如下步驟：
(1)利用缺陷性分支桿菌對植物甾醇進行發酵轉化；
(2)發酵產物經濃縮、甲醇萃取后再提純，得到去氫表雄酮晶體。
5.根據權利要求4所述的制備去氫表雄酮的方法，其特征在于，所述步驟(1)包括，將缺陷性分支桿菌在種子培養基中進行繁殖，待種子培養基OD600＝10～12時，以9～16％的接種量將其接入裝有發酵培養基中進行發酵轉化。
6.根據權利要求5所述的制備去氫表雄酮的方法，其特征在于，所述種子培養基包括如下質量百分比的組分：葡萄糖1～2％，硝酸鈉0.3～0.7％，磷酸二氫鉀0.03～0.06％，硫酸鎂0.03～0.07％，玉米漿4～6％；所述種子培養基的pH為7.0～7.4。
7.根據權利要求5所述的制備去氫表雄酮的方法，其特征在于，所述發酵培養基包括如下質量百分比的組分：植物甾醇3～4％，硝酸鈉0.3～0.6％，磷酸二氫鉀0.03～0.06％，硫酸鎂0.04～0.08％，玉米漿3～6％，豆餅油14～16％；所述發酵培養基的pH為6.8～7.6。
8.根據權利要求5所述的制備去氫表雄酮的方法，其特征在于，所述發酵條件為溫度28～33℃，罐壓0.03～0.06MPa，攪拌轉速180～240rpm，發酵周期5～8天。
9.根據權利要求5所述的制備去氫表雄酮的方法，其特征在于，所述步驟(2)包括如下步驟：
a)提純去氫表雄酮的方法，將步驟(1)制得的發酵產物分層，取油層進行減壓濃縮；
b)甲醇萃取經步驟a)得到的濃縮液，再濃縮、烘干，得粗品，粗品經重結晶得去氫表雄酮晶體。
10.根據權利要求9所述的制備去氫表雄酮的方法，其特征在于，所述步驟b)利用甲苯重結晶。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于湖北共同生物科技有限公司;湖北工業大學，未經湖北共同生物科技有限公司;湖北工業大學許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201710565607.8/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
