[發明專利]具有高抗原呈遞的DC細胞和抗原特異性T細胞及其制備方法和應用有效
| 申請號： | 201710562430.6 | 申請日： | 2017-07-11 |
| 公開（公告）號： | CN107217041B | 公開（公告）日： | 2020-05-15 |
| 發明（設計）人： | 劉韜;陳雪梅;周美玲 | 申請（專利權）人： | 深圳華云生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/10 | 分類號： | C12N5/10;C12N5/0783;A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 深圳中一聯合知識產權代理有限公司 44414 | 代理人： | 李艷麗 |
| 地址： | 518000 廣東省深圳市龍*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 具有 抗原 呈遞 dc 細胞 特異性 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種具有高抗原呈遞的DC細胞的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
提供DC細胞；
在所述DC細胞上負載抗原；以及
向所述DC細胞內導入基因表達沉默劑，所述基因表達沉默劑用于沉默Tao-1蛋白磷酸激酶基因的表達，得到所述具有高抗原呈遞的DC細胞；
所述基因表達沉默劑為所述Tao-1蛋白磷酸激酶的shRNA，且所述Tao-1蛋白磷酸激酶的shRNA的正義鏈的堿基序列如SEQ ID No.1所示，所述Tao-1蛋白磷酸激酶的shRNA的反義鏈的堿基序列如SEQ ID No.2所示。
2.一種具有高抗原呈遞的DC細胞，其特征在于，所述具有高抗原呈遞的DC細胞通過如權利要求1所述的具有高抗原呈遞的DC細胞的制備方法制備得到。
3.一種抗原特異性T細胞的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
提供DC細胞；
在所述DC細胞上負載抗原；
向所述DC細胞內導入基因表達沉默劑，所述基因表達沉默劑用于沉默Tao-1蛋白磷酸激酶基因的表達，得到具有高抗原呈遞的DC細胞；
將T細胞與所述具有高抗原呈遞的DC細胞混合，并置于含有四環素的培養基中共同培養；以及
收集共同培養后的所述T細胞，得到所述抗原特異性T細胞；
其中，所述基因表達沉默劑為所述Tao-1蛋白磷酸激酶的shRNA，且所述Tao-1蛋白磷酸激酶的shRNA的正義鏈的堿基序列如SEQ ID No.1所示，所述Tao-1蛋白磷酸激酶的shRNA的反義鏈的堿基序列如SEQ ID No.2所示。
4.根據權利要求3所述的抗原特異性T細胞的制備方法，其特征在于，所述含有四環素的培養基中，所述四環素的終濃度為0.5mg/mL～5mg/mL。
5.根據權利要求3所述的抗原特異性T細胞的制備方法，其特征在于，所述含有四環素的培養基中還含有終濃度為10ng/mL～1000ng/mL的GM-CSF、終濃度為0.1ng/mL～100ng/mL的IL-4和體積分數為0.1％～20％的血漿。
6.根據權利要求3所述的抗原特異性T細胞的制備方法，其特征在于，所述將T細胞與所述具有高抗原呈遞的DC細胞混合，并置于含有四環素的培養基中共同培養的操作中，所述T細胞與所述具有高抗原呈遞的DC細胞的個數比為1～20：1，所述共同培養的時間為1天～15天。
7.一種抗原特異性T細胞，其特征在于，所述抗原特異性T細胞通過如權利要求3～6任一項所述的抗原特異性T細胞的制備方法制備得到。
8.如權利要求1所述的具有高抗原呈遞的DC細胞的制備方法制備得到的具有高抗原呈遞的DC細胞或如權利要求3～6任一項所述的抗原特異性T細胞的制備方法制備得到的抗原特異性T細胞在制備抗腫瘤的藥物中的應用。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于深圳華云生物技術有限公司，未經深圳華云生物技術有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201710562430.6/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
