[發明專利]含活細胞的組織工程皮膚及其制備方法

有效

• 申請號: 201710562163.2
• 申請日: 2017-07-11
• 公開（公告）號: CN107320781B
• 公開（公告）日: 2020-03-10
• 發明（設計）人: 劉少輝;車七石
• 申請（專利權）人: 廣州潤虹醫藥科技股份有限公司
• 主分類號: A61L27/40
• 分類號: A61L27/40;A61L27/38;A61L27/22;A61L27/20;A61L27/36;A61L27/50;A61L27/54;A61L27/58;A61L27/60
• 代理公司: 廣州科沃園專利代理有限公司 44416
• 代理人: 張帥

本發明屬于組織工程技術領域，具體涉及到一種含活細胞的組織工程皮膚及其制備方法，該組織工程皮膚包括表皮層、仿真皮層和真皮層，所述的仿真皮層包括角朊細胞、成纖維細胞和生物支架材料，其中角朊細胞與成纖維細胞的密度比為0.1?0.2:1；所述的生物支架材料由明膠、殼聚糖、谷酰胺肽和透明質酸按質量比6?7:1.5?2:0.5?1:1組成，本發明制得的組織皮膚具有良好的生物相容性，良好的可塑性和機械強度，可以較好地修復創面。

技術領域

本發明屬于組織工程技術領域，具體涉及到一種含活細胞的組織工程皮膚及其制備方法。

背景技術

組織工程學(tissueengineering)是一門以細胞生物學、工程學和材料學相結合，在體外或體內構建組織或器官替代物，用于修復、維持或改善機體形態和功能的一門新興的交叉學科。其中組織工程皮膚是利用組織工程的原理構建人工皮膚替代物，用于皮膚移植，可以有效解決臨床上皮膚缺損修復，供皮不足的難題。

皮膚組織工程是組織工程學中發展最早，最成熟的領域，第一種經FDA批準上市的組織工程產品就是組織工程皮膚。臨床上皮膚潰瘍包括糖尿病的潰瘍、靜脈性難治性潰瘍、壞疽性膿皮病潰瘍以及一些其他疾病導致的潰瘍等，常規的治療方法往往不能獲得滿意的效果，而采用人工皮膚治療之后效果顯著。

目前，已經有多種皮膚產品問世，并用于臨床治療，取得了一定療效，但是同時存在一些缺陷，比如相容性差，排斥反應，培養周期長，移植后易形成水泡，易出現疤痕攣縮，導致皮膚內水分丟失等，為了使組織工程皮膚更加接近人體皮膚，越來越多的研究對其進行了創新改進。

公告號為CN102462864B的中國專利公開了一種組織工程皮膚構建方法，該方法采用人表皮干細胞、真皮成纖維細胞作為種子細胞，以經過人胎盤IV型膠原修飾的同種無細胞真皮基質作為支架，利用氣液界面分離培養法復合構建為一種有活性的雙層組織工程皮膚。該方法構建的組織工程皮膚更接近天然皮膚的結構，其中真皮膠原支架結構完整，表皮層中具有多層不同分化程度的細胞，達到組織工程皮膚的形態學要求，但是該發明培養基中加入了胎牛血清，容易發生排斥反應。

公開號為CN104740689A的中國專利申請公開了一種含活細胞的復合組織工程皮膚及其制備方法。該復合組織工程皮膚既含有活細胞，又含有可降解的聚合材料保護層，使得該復合組織工程皮膚隔離能力增強，成本降低，保質期延長。克服了現有技術中含有活細胞的組織工程皮膚成本高昂，保質期短，隔離能力差的缺陷。但是該發明中使用的可降解的聚合材料保護層在人體中降解時間長，容易造成創面貼服效果差。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明公開了一種含活細胞的組織工程皮膚及其制備方法，制得的組織皮膚具有良好的生物相容性，良好的可塑性和機械強度，可以較好地修復創面。

本發明具體技術方案如下所示：

一種含活細胞的組織工程皮膚，包括表皮層、仿真皮層和真皮層，所述的仿真皮層包括角朊細胞、成纖維細胞和生物支架材料，其中角朊細胞與成纖維細胞的密度比為0.1-0.2:1；所述的生物支架材料由明膠、殼聚糖、谷酰胺肽和透明質酸按質量比6-7:1.5-2:0.5-1:1組成。

本發明在表皮層與真皮層之間加入了仿真皮層，使表皮與仿真皮層接觸更加緊密，避免了表皮層與真皮層直接接觸容易剝落的缺點，試驗證明仿真皮層中含有的角朊細胞與成纖維細胞生長無序，可以有效增加組織工程皮膚的韌性，提高創面愈合效果；并且本發明使用的生物支架材料中加入了谷酰胺肽，有利于其分解，并且試驗發現，加入谷酰胺肽可以提高皮膚的韌性和彈性，應用在生物支架材料中有利于提高其機械強度，谷酰胺肽與人體有較好的親和性，有利于組織工程皮膚使用時與創面具有來良好的親和力，此外，谷酰胺肽還可以為后續的細胞生長提供養料。