[發(fā)明專利]一種大型真菌發(fā)酵法生產(chǎn)富含巖藻糖的真菌多糖產(chǎn)品的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710559506.X
• 申請日: 2017-07-11
• 公開（公告）號: CN107338276B
• 公開（公告）日: 2019-11-12
• 發(fā)明（設計）人: 張厚程;王鵬;苗強;白義化
• 申請（專利權(quán)）人: 威海市宇王集團有限公司;山東大學
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12R1/645
• 代理公司: 青島致嘉知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 37236
• 代理人: 單虎

本發(fā)明提供了一種大型真菌發(fā)酵法生產(chǎn)富含巖藻糖的真菌多糖的方法，具體是選擇大型珍貴真菌（包括靈芝、蟲草菌、金針菇、香菇，等等珍貴的食用和藥用真菌）中的靈芝進行發(fā)酵，在基本培養(yǎng)基（PDA培養(yǎng)基）中添加靈芝代謝合成靈芝多糖的前體物?巖藻多糖，經(jīng)30℃，180rpm搖床培養(yǎng)5d，得到富含巖藻糖的靈芝多糖產(chǎn)品。本發(fā)明在基本培養(yǎng)基中添加巖藻多糖可以極大地增加靈芝多糖中的巖藻糖含量（與對照比較），這將有利于提高靈芝多糖抗腫瘤活性和免疫調(diào)節(jié)活性，因此本發(fā)明具有很好的開發(fā)應用價值，將會產(chǎn)生較好的經(jīng)濟和社會效益。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于食品、保健品領(lǐng)域，具體涉及一種利用大型真菌發(fā)酵法生產(chǎn)富含巖藻糖的真菌多糖的方法。

背景技術(shù)

真菌多糖是大型食用和藥用真菌類中最有效的成分之一，其藥理作用特別受到科技工作者的重視，有關(guān)的實驗證據(jù)也最多。如動物實驗證實，靈芝多糖能顯著調(diào)節(jié)機體免疫力，提高機體耐缺氧能力，消除自由基，抑制腫瘤、抗輻射、降血糖、保護肝臟等作用。

Chun Xiao等(2012)研究了大型真菌中靈芝多糖對2型糖尿病模型小鼠血糖的影響，發(fā)現(xiàn)靈芝多糖能劑量依賴性地降低實驗鼠空腹血糖，其機制是降低了實驗小鼠肝臟糖質(zhì)新生和肝糖降解的關(guān)鍵酶：肝糖磷酸化酶(GP)、葡萄糖-1,6-二磷酸酶(FBPase)、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCK)、葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)的mRNA水平。

Chi-Huey Wong等(2009)試驗證實靈芝多糖與乙酸配合使用，可以增加模式生物秀麗隱桿線蟲壽命相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子DAF-16的表達，蛋白組學對照分析，實驗組中15種增壽蛋白有差異性表達。

目前，大型真菌中的靈芝多糖、鮮菇多糖、灰樹花多糖等的抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)活性研究較多。最著名的是Chi-Huey Wong等2013年發(fā)表在美國科學院院報的一篇關(guān)于靈芝多糖的研究報告，研究發(fā)現(xiàn)：試驗小鼠通過腹腔注射靈芝多糖可以有效抑制肉瘤S-180和Lewis肺癌增殖，證明靈芝多糖具有抗腫瘤活性。進一步系統(tǒng)研究了靈芝多糖的抗腫瘤免疫機制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：通過對靈芝多糖免疫的小鼠的脾淋巴細胞的免疫活性物質(zhì)表達譜分析，證實靈芝多糖免疫可以增加小鼠脾淋巴細胞的IL-1,IL-6,IL-12,IFN-c,TNF-a,GM-CSF,G-CSF和M-CSF表達。作用機制是靈芝多糖首先與巨噬細胞的TLR4受體結(jié)合，TLR4-靈芝多糖復合物進一步激活胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)、c-Jun N-末端激酶(JNK)和p38，誘導IL-1的表達。靈芝多糖還可以強烈引起腹腔B1B細胞增殖，這暗示抗血清中抗糖抗體IgM的增加。聚糖微陣列分析顯示，靈芝多糖免疫產(chǎn)生的IgM可特異性識別腫瘤相關(guān)糖抗原的非還原端所含有的Fucα1-2Gal,Fucα1-3/4Man,Fucα1-4Xyl和Fucα1-2Fuc等特殊結(jié)構(gòu)，這些結(jié)構(gòu)典型存在于腫瘤相關(guān)抗原Globo H中。推斷靈芝多糖抗腫瘤的分子基礎在于其特殊的糖組成及其形成的特殊的糖苷鍵，其中重要的單糖是巖藻糖，巖藻糖苷酶酶解后的靈芝多糖重復上述的抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)實驗，證實靈芝多糖中巖藻糖的重要性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明公開了一種大型真菌發(fā)酵法生產(chǎn)富含巖藻糖的真菌多糖的方法：是經(jīng)過菌種選擇，利用液體發(fā)酵，在基本培養(yǎng)基中添加巖藻多糖，經(jīng)大型真菌代謝后，產(chǎn)生富含巖藻糖的真菌多糖產(chǎn)品。

與對照相比，本發(fā)明的優(yōu)點和積極效果是：本發(fā)明通過在大型真菌發(fā)酵培養(yǎng)基中添加來自于褐藻和棘皮動物的巖藻多糖，能極大地提高了大型真菌發(fā)酵產(chǎn)物中真菌多糖(有多種單糖通過糖苷鍵鏈接而成)中巖藻糖的含量，有研究顯示真菌多糖中重要的單糖-巖藻糖對與真菌多糖的抗腫瘤活性和免疫調(diào)節(jié)活性十分重要。因此本發(fā)明生產(chǎn)的富含巖藻糖的真菌多糖制品將為腫瘤治療提供有益的輔助，提高人體的免疫能力，為人類健康提供有益的幫助，具有重大的市場應用價值。

附圖說明

圖1液體發(fā)酵靈芝多糖中的單糖組成離子色譜分析；