[發(fā)明專利]一種不飽和脂肪酸固相微萃取方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710558992.3
• 申請(qǐng)日: 2017-07-11
• 公開（公告）號(hào): CN107290455B
• 公開（公告）日: 2019-07-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王家斌;姜楠;李文邦;張其清
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 福州大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/60
• 代理公司: 福州元?jiǎng)?chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學(xué)俊;林捷

本發(fā)明公開了一種不飽和脂肪酸固相微萃取方法。本發(fā)明是以銀納米粒固定化整體柱作為固相微萃取整體柱，結(jié)合管內(nèi)固相微萃取?高效液相色譜聯(lián)用系統(tǒng)，建立不飽和脂肪酸固相微萃取新方法。本發(fā)明利用整體柱表面的銀納米粒與不飽和脂肪酸碳碳雙鍵之間的相互作用實(shí)現(xiàn)不飽和脂肪酸的富集；并利用銀納米粒與不飽和脂肪酸不同異構(gòu)體之間作用力的不同，實(shí)現(xiàn)不飽和脂肪酸不同異構(gòu)體的順序洗脫。本發(fā)明方法簡(jiǎn)單，工藝巧妙，所需儀器普及度較高，易于推廣，可實(shí)現(xiàn)不飽和脂肪酸的高效富集和不同順反異構(gòu)體的順序洗脫，并滿足反式脂肪酸高效檢測(cè)要求。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種不飽和脂肪酸固相微萃取方法。

背景技術(shù)

不飽和脂肪酸是食用植物油的主要組成成分，不飽和脂肪酸中所帶有的碳碳雙鍵有順式和反式兩種存在形式：順式鍵形成的不飽和脂肪酸室溫下是液態(tài)，反式鍵形成的不飽和脂肪酸室溫下是固態(tài)。在現(xiàn)代食品工業(yè)中，為防止油脂變質(zhì)和改善加工食品風(fēng)味，人們對(duì)植物油進(jìn)行部分氫化處理得到部分氫化植物油。部分氫化植物油中所含的大量不飽和脂肪酸都是室溫下可呈現(xiàn)固態(tài)的反式脂肪酸（Trans-fatty acid, TFA）。因此，部分氫化油具有耐高溫、不易變質(zhì)、存放時(shí)間久等優(yōu)點(diǎn)，并在蛋糕、餅干、速溶咖啡、速凍比薩餅、薯?xiàng)l、爆米花等食品加工過程中得到普遍使用。研究表明，食用過多的TFA會(huì)增加心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)、降低紅細(xì)胞對(duì)胰島素的反應(yīng)、促生糖尿病、升高膽固醇、導(dǎo)致必需脂肪酸的缺乏和影響嬰幼兒的生長(zhǎng)發(fā)育等。世界衛(wèi)生組織提出TFA攝入所占能量應(yīng)該控制在小于攝入食品總能量的1%。針對(duì)當(dāng)前工業(yè)化食品中廣泛含有TFA的現(xiàn)象，開發(fā)快速準(zhǔn)確的TFA檢測(cè)方法勢(shì)在必行。目前，TFA檢測(cè)的主要難點(diǎn)在于因TFA與食品中大量存在的其順式異構(gòu)體——順式脂肪酸（Cis-fatty acid, CFA）的結(jié)構(gòu)非常相近，導(dǎo)致其難以區(qū)分，對(duì)定性和定量分析造成較大的影響。

固相微萃取（Solid phase microextraction, SPME）是一種新型的樣品前處理方法，具有簡(jiǎn)便、快速、高效、有機(jī)溶劑消耗量低、易與其他儀器聯(lián)用等優(yōu)點(diǎn)，在分析化學(xué)領(lǐng)域受到了廣泛的關(guān)注。SPME的萃取原理是基于樣品組分與固定相之間的分配平衡，因此開發(fā)新型SPME固定相成為了SPME方法的核心。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，銀納米粒與不飽和化合物所帶有的碳碳雙鍵之間存在著特殊的作用力，這種作用力隨著雙鍵數(shù)量的增加而提高，隨著碳鏈的增長(zhǎng)而變小，同時(shí)順式不飽和化合物的作用力要強(qiáng)于反式不飽和化合物。由此啟發(fā)，本課題組將銀納米粒與SPME技術(shù)相結(jié)合，制備了銀納米粒固定化SPME整體柱，并基于該整體柱，結(jié)合管內(nèi)固相微萃取-高效液相色譜（In-tube SPME-HPLC）聯(lián)用系統(tǒng)，發(fā)展一種不飽和脂肪酸固相微萃取新方法，實(shí)現(xiàn)不飽和脂肪酸的高效富集和不同順反異構(gòu)體的順序洗脫，滿足反式脂肪酸高效檢測(cè)要求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種不飽和脂肪酸固相微萃取新方法。本發(fā)明是以銀納米粒固定化整體柱作為固相微萃取整體柱，結(jié)合管內(nèi)固相微萃取-高效液相色譜（In-tubeSPME-HPLC）聯(lián)用系統(tǒng)，建立不飽和脂肪酸固相微萃取新方法。得益于負(fù)載的銀納米粒與不飽和脂肪酸碳碳雙鍵之間的相互作用實(shí)現(xiàn)不飽和脂肪酸的富集；并利用銀納米粒與不飽和脂肪酸不同異構(gòu)體之間作用力的不同，實(shí)現(xiàn)不飽和脂肪酸不同異構(gòu)體的順序洗脫。該固相微萃取方法可實(shí)現(xiàn)油酸甲酯（主要是順-6-十八碳烯酸甲酯、反-6-十八碳烯酸甲酯、順-9-十八碳烯酸甲酯、反-9-十八碳烯酸甲酯）、亞油酸甲酯（主要是順-9,順-12-十八碳二烯酸甲酯、順-9,反-12-十八碳二烯酸甲酯、反-9,順-12-十八碳二烯酸甲酯、反-9,反-12-十八碳二烯酸甲酯）等食品中常見不飽和脂肪酸類化合物的高效富集、順序洗脫，并滿足反式脂肪酸高效檢測(cè)要求。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一種不飽和脂肪酸固相微萃取新方法，其是以銀納米粒固定化整體柱作為固相微萃取整體柱，結(jié)合管內(nèi)固相微萃取-高效液相色譜聯(lián)用系統(tǒng)得以構(gòu)建。所述的不飽和脂肪酸固相微萃取新方法，包括以下步驟：

1）銀納米粒固定化固相微萃取整體柱的制備：