[發明專利]一種艾塞那肽雜質含量的分析方法

在審

• 申請號: 201710558482.6
• 申請日: 2017-07-11
• 公開（公告）號: CN109239242A
• 公開（公告）日: 2019-01-18
• 發明（設計）人: 代連花;趙慧英;張磊;張林
• 申請（專利權）人: 齊魯制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種艾塞那肽雜質含量的分析方法，屬于藥物分析技術領域。本發明將艾塞那肽及三個特定雜質采用胰蛋白酶酶切，酶切后樣品分別采用兩種色譜方法進行分離，以外標法計算測定艾塞那肽中雜質[D?His¹]?艾塞那肽、雜質[Double Pro³⁸]?艾塞那肽及雜質[Des?Gly²]?艾塞那肽含量。本發明的方法便捷、有效、精準度高，能夠有效分離雜質并準確定量。

技術領域

本發明屬于藥物分析技術領域，具體涉及一種艾塞那肽雜質含量的分析方法。該分析方法能夠簡便分離和準確定量測定艾塞那肽三個特定雜質，可作為艾塞那肽質量控制的重要組成部分。

背景技術

艾塞那肽(Exenatide)是美洲巨蜥蜴毒液中提取分離的含有39個氨基酸的多肽序列，與GLP-1具有53％的同源性，由于不易被DPP-Ⅳ降解而表現出更強的穩定性及生物活性。艾塞那肽為GLP-1受體激動劑，可促進胰島素分泌，主要用于改善Ⅱ型糖尿病患者的血糖控制。

艾米林制藥公司(Amylin)與美國禮來公司共同研發的艾塞那肽注射液(Byetta，百泌達)于2005年在美國上市，長效艾塞那肽(Bydureon，百達揚)分別于2011年獲得歐盟批準，2012年獲得FDA批上市。

艾塞那肽原料藥采用固相合成方法制備，在艾塞那肽合成工藝中會產生一系列與其結構、性質類似的雜質，如非對映異構體、缺失肽等，目前已公開的艾塞那肽有關物質檢測方法分離能力較差，無法對特定雜質進行準確分離定量，尤其是對非對映異構體雜質[D-His¹]-艾塞那肽的分離困難較大。有文獻報道，將艾塞那肽全水解為氨基酸，采用氘代試劑衍生后，利用氣相手性色譜柱分離，質譜定量檢測的方法對雜質[D-His¹]-艾塞那肽進行控制，該方法所用儀器、試劑及色譜柱均較為特殊，檢測成本高，且方法操作繁瑣，重復性較差。

為有效分析和檢測藥品質量，保證用藥安全，仍需要開發出一種便捷、有效檢測艾塞那肽相關雜質的分析方法。

艾塞那肽及需檢測雜質的序列結構如下：

1)艾塞那肽

H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-NH₂

2)[D-His¹]-艾塞那肽

H-D-His¹-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu¹⁰-Ser-Lys-Gln-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-NH₂

3)[Double Pro³⁸]-艾塞那肽

H-His¹-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu¹⁰-Ser-Lys-Gln-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro³⁸-Pro³⁸-Ser³⁹-NH₂

4)[Des-Gly²]-艾塞那肽