[發明專利]青貯玉米中非結構性碳水化合物含量測定方法

在審

• 申請號: 201710552191.6
• 申請日: 2017-07-07
• 公開（公告）號: CN107167550A
• 公開（公告）日: 2017-09-15
• 發明（設計）人: 南張杰;史冬梅;張秋芝;潘金豹;王曄;楊柳
• 申請（專利權）人: 北京農學院
• 主分類號: G01N31/10
• 分類號: G01N31/10;G01N1/28
• 代理公司: 北京凱特來知識產權代理有限公司11260
• 代理人: 鄭立明,付久春

1.一種青貯玉米中非結構性碳水化合物含量測定方法，其特征在于，包括：

取所檢測的青貯玉米全株進行粉碎、殺青、烘干后，再次粉碎過40目篩，烘干，密閉保存，制備成待測樣品；定量稱取所述待測樣品，加入氯化鈉緩沖液懸浮，沸水浴10min使淀粉糊化，糊化后冷卻至60℃以下，依次加入α-淀粉酶液、支鏈淀粉酶液和糖化酶液，分別用各酶的最適反應環境孵育水解，定容、過濾，取濾液測還原糖，根據還原糖計算得出所檢測的青貯玉米的非結構性碳水化合物含量。

2.根據權利要求1所述的青貯玉米中非結構性碳水化合物含量測定方法，其特征在于，所述方法中，根據還原糖計算得出所檢測的青貯玉米的非結構性碳水化合物含量的計算公式如下：

上式中：k：還原性單糖標準曲線斜率；

V₁：樣品溶液總體積(ml)；

m：樣品重量(g)；

V₂：顯色用樣體積(ml)；

0.9：與還原性單糖的轉換系數；

OD值：吸光值；

精確度：在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10％。

3.根據權利要求1或2所述的青貯玉米中非結構性碳水化合物含量測定方法，其特征在于，所述方法中，向所述青貯玉米淀粉中加入氯化鈉緩沖液的加入量為100ml，該氯化鈉緩沖液中NaCl的質量百分濃度為0.3％。

4.根據權利要求1所述的青貯玉米中非結構性碳水化合物含量測定方法，其特征在于，所述方法中，依次加入α-淀粉酶液、支鏈淀粉酶液和糖化酶液作為檢測劑，用酶的最適溫度孵育水解包括：

先向冷卻后的青貯玉米樣品糊化物中加入α-淀粉酶液，在85℃孵育40min,水解使青貯玉米淀粉糊化物液化；

然后，向青貯玉米淀粉糊化物液化液中加入支鏈淀粉酶液，在60℃孵育糖化酶30min，水解該液化液中的α-1,6糖苷鍵支鏈淀粉；

最后，向液化液后加入糖化酶液，在60℃孵育30min，水解液化液中的極限糊精及麥芽糖成葡萄糖。

5.根據權利要求1或4所述的青貯玉米中非結構性碳水化合物含量測定方法，其特征在于，所述方法的依次加入α-淀粉酶液、支鏈淀粉酶液和糖化酶液作為檢測劑中，

所述α-淀粉酶液的加入量為10ml，質量百分濃度為1％；

所述支鏈淀粉酶液的加入量為10ml，質量百分濃度為1％；

所述糖化酶液的加入量為10ml，質量百分濃度為10％。

6.根據權利要求1或2所述的青貯玉米中非結構性碳水化合物含量測定方法，其特征在于，所述方法中，所檢測的青貯玉米全株進行粉碎、殺青、烘干后，再次粉碎過40目篩，烘干，密閉保存，制備成待測樣品。

7.根據權利要求1或2所述的青貯玉米中非結構性碳水化合物含量測定方法，其特征在于，所述方法中，定容,過濾。