[發明專利]哌拉西林誘導溶血檢測試劑盒及其制備方法

在審

• 申請號: 201710550416.4
• 申請日: 2017-07-07
• 公開（公告）號: CN107132323A
• 公開（公告）日: 2017-09-05
• 發明（設計）人: 陳亞平;吳明磊
• 申請（專利權）人: 江蘇中濟萬泰生物醫藥有限公司
• 主分類號: G01N33/15
• 分類號: G01N33/15;G01N33/559
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種哌拉西林誘導溶血檢測試劑盒及其制備方法，適用于檢測診斷使用哌拉西林治療引起且正在發生的溶血，以及預測將要使用哌拉西林的治療是否可能引起溶血，指導臨床合理選擇使用抗生素。

背景技術

目前，藥物造成的不良反應日漸增多，其中藥源性溶血性貧血的病例也逐年增多。若不及時停藥或進行治療，將會加重病情甚至危及生命。哌拉西林為第三代半合成青霉素，具有廣譜抗菌作用，為臨床上最常用的抗菌藥物之一，臨床上主要用于綠膿桿菌及其他敏感的革蘭氏陰性桿菌所致的肺炎、敗血癥、呼吸道、膽道和泌尿系統感染、亞急性心內膜炎及化膿性腦膜炎等。已有文獻報道，哌拉西林可誘導免疫性溶血性貧血的發生。柱凝膠檢測方法目前已廣泛用于ABO血型、血清中不規則抗體的檢測以及其在交叉配血中，但在哌拉西林誘導型溶血的檢測中尚未見相關研究報道。微柱凝膠技術具有所需標本量少、無須洗滌、結果穩定、易于判讀等優點，有望成為哌拉西林誘導型溶血檢測的常規篩查技術，由于不需要大型儀器，且操作簡單，價格便宜，適合中小醫院及社區、鄉鎮醫院開展，為我們哌拉西林誘導型溶血前期篩查提供便利。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是針對上述現有技術提供一種靈敏度高、重復性好、操作簡便、價格便宜且質量穩定的哌拉西林誘導溶血檢測試劑盒及其制備方法。

本發明解決上述問題所采用的技術方案為：一種哌拉西林誘導溶血檢測試劑盒，它包括盒體和盒蓋，所述盒體底面上設置有防滑膠層，所述盒體內設置有哌拉西林誘導型溶血檢測試劑卡I和哌拉西林誘導型溶血檢測試劑卡II，所述哌拉西林誘導型溶血檢測試劑卡I和哌拉西林誘導型溶血檢測試劑卡II均包括豎直固定板，所述豎直固定板頂部設置有水平支撐板，所述水平支撐板上設置有多個微柱型凝膠管，所述微柱型凝膠管包括反應腔和凝膠分離柱，所述反應腔位于凝膠分離柱上方，所述反應腔頂部設置有一圈凸緣，所述凝膠分離柱內自上而下設置有多層分離網，所述凸緣擱置于水平支撐板上，所述水平支撐板下方設置有支撐架，所述微柱型凝膠管插裝于支撐架內，所述水平支撐板上方設置有保護膜，所述保護膜覆蓋于多個微柱型凝膠管的凸緣上。

所述反應腔內壁上均勻設置有多個緩沖凸點。

所述水平支撐板正面平行設置有多個隔條，所述隔條設置于相鄰兩個微柱型凝膠管之間。

所述哌拉西林誘導型溶血檢測試劑卡I有6個微柱型凝膠管，每個微柱管中均含有葡聚糖凝膠顆粒，凝膠顆粒中含有抗IgG或抗C3d成分；所述哌拉西林誘導型溶血檢測試劑卡II有8個微柱型凝膠管，每個微柱管中均含有葡聚糖凝膠顆粒，凝膠顆粒中含有抗IgG+C3d成分。

所述試劑盒的盒體內還設置有哌拉西林處理紅細胞、非哌拉西林處理紅細胞、抗體陽性對照液和抗體陰性對照液，所述哌拉西林處理紅細胞是通過哌拉西林藥物溶液處理的正常O型Rh陰性紅細胞，濃度為2～2.5%；所述非哌拉西林處理紅細胞是濃度為2～2.5%的正常O型Rh陰性紅細胞；所述哌拉西林抗體陽性対照液是哌拉西林抗體陽性血清；所述哌拉西林抗體陰性對照液是哌拉西林抗體陰性血清。

一種哌拉西林誘導溶血檢測試劑盒的制備方法，所述方法包括如下步驟：

一、哌拉西林誘導型溶血檢測試劑卡I的制備：

步驟一、量取

按批量使用符合要求的器具將葡聚糖凝膠量取轉移至潔凈并滅菌的容器中；

步驟二、洗滌

用0.9%氯化鈉溶液洗滌葡聚糖凝膠，0.9%氯化鈉溶液與葡聚糖凝膠體積比為2:1，充分混勻，2000rpm離心1分鐘后移去上清液，重復操作6~8次，得洗滌后凝膠，作好標識；作為優選，洗滌后的凝膠中可添加乳糖0.02-0.1（v/v）%、以及檸檬酸三鉀20mg-40 mg %，在試劑盒保存過程中穩定體系的pH值，并保持良好的均勻度。

步驟三、配制

按批量分別量取抗人球蛋白試劑、抗人球蛋白試劑、0.9%氯化鈉溶液，按抗體與凝膠體積比1:5的比例，將上述試劑分別加入洗滌后凝膠中混合，分別用器具混合均勻成抗體凝膠，分別作好標識；

步驟四、灌裝、離心

將步驟三配制的凝膠按照每孔20～30 μl的抗體凝膠量將各種凝膠加入微管中；