[發明專利]甲砜霉素與氟苯尼考關鍵中間體的生物制備方法

有效

• 申請號: 201710533399.3
• 申請日: 2017-07-03
• 公開（公告）號: CN109207531B
• 公開（公告）日: 2022-04-19
• 發明（設計）人: 張福利;陳少欣;倪國偉;鄒杰;湯佳偉;譚支敏;郭翔
• 申請（專利權）人: 上海醫藥工業研究院;中國醫藥工業研究總院
• 主分類號: C12P13/00
• 分類號: C12P13/00;C07C315/04;C07C317/32
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 崔佳佳;陸鳳

1.一種化合物Y的制備方法，其特征在于：包括步驟：

在液態反應體系中，以化合物X為底物，在輔酶存在下，在(R,S)-羰基還原酶催化下，進行式A所示的反應，從而形成化合物Y；

式A中，

其中，所述羰基還原酶來源于羰基還原酶EA，其氨基酸序列如SEQ ID NO.：1所示。

2.根據權利要求1中所述的制備方法，其特征在于，所述的輔酶選自下組：還原性輔酶、氧化性輔酶，或其組合。

3.根據權利要求1或2中所述的制備方法，其特征在于,所述的輔酶選自下組：NADH、NADPH、NAD、NADP、或其組合。

4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于,所述NADH、NADPH、NAD或NADP用量與底物用量的重量比率為0.01％～1.0％。

5.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于,所述NADH、NADPH、NAD或NADP用量與底物用量的重量比率為0.01％～0.5％。

6.根據權利要求1或2中任一所述的制備方法，其特征在于，所述的反應體系中，還存在用于輔酶再生的酶。

7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述的用于輔酶再生的酶選自下組：醇脫氫酶、甲酸脫氫酶、葡萄糖脫氫酶、或其組合。

8.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述的反應體系中，還存在用于輔酶再生的共底物。

9.根據權利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述的共底物選自下組：異丙醇、葡萄糖、甲酸銨、或其組合。

10.根據權利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述的反應體系中，共底物的濃度為5-30％。

11.根據權利要求1或2中任一所述的制備方法，其特征在于，所述方法還包括：從所述上一步驟的反應后的反應體系中分離出化合物Y。

12.根據權利要求11所述的制備方法，其特征在于，所述反應后的反應體系中，化合物Y的ee值≥90％；de值≥90％。

13.根據權利要求11所述的制備方法，其特征在于，所述反應后的反應體系中，化合物X被轉化為化合物Y的轉化率≥80％。

14.根據權利要求11所述的制備方法，其特征在于，所述反應后的反應體系中，化合物Y的de值≥95％。

15.根據權利要求12-14中任一項所述的制備方法，其特征在于，所述反應后的反應體系中，化合物Y的ee值≥99％。

16.根據權利要求11所述的制備方法，其特征在于，化合物X被轉化為化合物Y的轉化率≥85％。

17.根據權利要求11所述的制備方法，其特征在于，化合物X被轉化為化合物Y的轉化率≥95％。

18.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的羰基還原酶EA的編碼基因序列如SEQ ID NO.：2所示的序列。