[發(fā)明專利]一種用于多殺菌素工業(yè)化大生產(chǎn)的提取工藝

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710529938.6
• 申請(qǐng)日: 2017-07-03
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107474088B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-08-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 梁振兵;安文俊;劉世寬;居亞?wèn)|
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 齊魯制藥（內(nèi)蒙古）有限公司
• 主分類號(hào): C07H17/08
• 分類號(hào): C07H17/08;C07H1/06
• 代理公司: 濟(jì)南金迪知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37219
• 代理人: 張宏松

本發(fā)明涉及一種用于多殺菌素工業(yè)化大生產(chǎn)的提取工藝，包括步驟：發(fā)酵液預(yù)處理，板框過(guò)濾，閃蒸烘干；甲醇浸泡菌絲；濃縮浸提液，轉(zhuǎn)相水洗；使用酒石酸反萃?。徽{(diào)節(jié)ph離心得到多殺菌素粗品；利用甲醇重結(jié)晶得到多殺菌素精品。本發(fā)明采用菌絲分離烘干后浸提的方式提取多殺菌素，浸取效率高，溶媒使用量小，僅為發(fā)酵液直接溶媒萃取的一半，且能耗相對(duì)較低，生產(chǎn)周期縮短；另外，板框過(guò)濾、閃蒸烘干、浸提、濃縮、水洗、反萃取、精制所需的設(shè)備比較普遍，很容易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)；所得產(chǎn)品收率高，達(dá)到了85％～90％，采用溶媒重結(jié)晶純化多殺菌素粗結(jié)晶后提升了多殺菌素的質(zhì)量，產(chǎn)品含量達(dá)到了95％～98％。

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及一種用于多殺菌素工業(yè)化大生產(chǎn)的提取工藝，屬于多殺菌素制備技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

多殺菌素是一種由土壤放線菌多刺甘蔗多孢菌在培養(yǎng)介質(zhì)下經(jīng)有氧發(fā)酵后產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，具有對(duì)害蟲(chóng)廣譜高效、對(duì)人、非靶標(biāo)動(dòng)物和環(huán)境安全、可生物降解的優(yōu)異特點(diǎn)，并因此獲得美國(guó)“總統(tǒng)綠色化學(xué)品挑戰(zhàn)獎(jiǎng)”。由于多殺菌素能有效防治多種儲(chǔ)糧害蟲(chóng)、用藥量極少、安全高效、低殘留，因而被認(rèn)為是一種極具前景的“綠色”儲(chǔ)糧防護(hù)劑。

對(duì)于多殺菌素的提取，國(guó)內(nèi)工藝的研究多數(shù)集中在溶媒萃取法和樹(shù)脂吸附提取法，雖然樹(shù)脂吸附提取法在一定程度上有較好的的效果，如純度較高，但是在大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)上，樹(shù)脂吸附提取工藝存在處理量小、對(duì)設(shè)備要求高，耗時(shí)長(zhǎng)、成本高等缺陷；雖然溶媒萃取法能在一定程度上克服這些缺點(diǎn)。但目前對(duì)多殺菌素的研究開(kāi)發(fā)大多只停留在實(shí)驗(yàn)室小試階段，無(wú)法進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)。

中國(guó)專利文獻(xiàn)CN 101906124 B公開(kāi)了一種從刺糖多孢發(fā)酵液中提取多殺菌素的工藝：它是將發(fā)酵液經(jīng)過(guò)預(yù)處理后，加入高介電常數(shù)極性有機(jī)溶劑浸泡提取多殺菌素，進(jìn)行固液分離，收集浸提清液，然后通過(guò)真空濃縮，揮發(fā)除去高介電常數(shù)極性溶劑，得到多殺菌素濃縮液；然后加入低介電常數(shù)或高碳醇萃取溶媒進(jìn)行萃取，得到負(fù)載有機(jī)相；加入酸水進(jìn)行反萃取，收集反萃取相；用NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值＝8.5～11.5，使多殺菌素沉淀，過(guò)濾，用稀堿液將多殺菌素沉淀洗滌1～3次，真空干燥，得到多殺菌素粉劑。該工藝采用萃取與反萃取相結(jié)合的技術(shù)路線，所需設(shè)備發(fā)展相對(duì)成熟，較容易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。但由于該工藝采用的是發(fā)酵液直接溶劑萃取法，需要較大溶媒浸提(1.5倍發(fā)酵液體積)才能保證多殺的浸提收率，且浸提完成后還需要進(jìn)一步將濃縮除去高介電常數(shù)極性溶劑，該過(guò)程存在溶媒使用量大，除去溶劑需要能耗較大，生產(chǎn)周期長(zhǎng)(發(fā)酵液需攪拌提取4～20h)等問(wèn)題；另外多殺菌素沉淀出多殺菌素粗品后該工藝僅采用稀堿液洗滌的方法未能較好的提高多殺菌素的內(nèi)在質(zhì)量，粗品的大部分色素以及調(diào)堿一同析出的雜質(zhì)無(wú)法根除，且產(chǎn)品晶型較差(因?yàn)檎{(diào)堿析出結(jié)晶速率較快)。

發(fā)明內(nèi)容：

針對(duì)現(xiàn)有多殺菌素工業(yè)化生產(chǎn)工藝中存在的溶媒使用量大、能耗高、生產(chǎn)周期長(zhǎng)、產(chǎn)品內(nèi)在質(zhì)量較差等的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種低溶媒、高收率多殺菌素的工業(yè)化提取方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種低溶媒、高收率多殺菌素的工業(yè)化提取方法，包括步驟如下：

(1)向發(fā)酵液中加入珍珠巖助濾劑、黃血鹽和硫酸鋅，混合均勻，然后升溫至85-90℃，保溫?cái)嚢?-3小時(shí)，得預(yù)處理后發(fā)酵液；

(2)預(yù)處理后發(fā)酵液利用板框壓濾機(jī)過(guò)濾，收集濾餅；

(3)將收集得到的濾餅閃蒸干燥至含水量為5％～10％，得到干菌絲；

(4)將干菌絲投入到浸提柱中，用低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑浸泡1～2小時(shí)，從浸提柱頂端通入氮?dú)?，收集有機(jī)溶劑浸提濃液，然后以每小時(shí)0.3～0.5m³的流速?gòu)捻敹思尤氲头悬c(diǎn)有機(jī)溶劑進(jìn)行洗脫，當(dāng)料液效價(jià)達(dá)到100u/ml時(shí)停止，合并浸提液；