[發明專利]一種分步發酵甲魚蛋制備抗氧化肽液的方法

在審

• 申請號: 201710529601.5
• 申請日: 2017-07-02
• 公開（公告）號: CN107177657A
• 公開（公告）日: 2017-09-19
• 發明（設計）人: 楊明毅;余艷;高紹利
• 申請（專利權）人: 常德至善生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;A61K8/64;A61Q19/08;A23L33/18;C12R1/125
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種分步發酵甲魚蛋制備抗氧化肽液的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

（1）對甲魚蛋進行清洗和干燥，并用驗光機對清洗和干燥后的甲魚蛋進行光照挑選，除去變質的甲魚蛋，得到健康的甲魚蛋；

（2）將選好的甲魚蛋放入攪拌機，注入2～5倍甲魚蛋體積的無菌去離子水，攪拌時間為5～25min，攪拌速度200～800r/min；

（3）碟片式離心機離心，轉速3000～6000rpm，時間10～20min，去除上層的的少量油脂和底層的甲魚蛋殼，得到中層的甲魚蛋膜、蛋清、蛋黃混合液，即甲魚蛋混合液；

（4）將甲魚蛋混合液加入葡萄糖10~20g /L，于100～120℃，壓力0.08～0.1Mpa條件下滅菌15～30min；

（5）將滅菌后的甲魚蛋混合液冷卻至室溫后，加入枯草芽孢桿菌菌種種子培養液，進行液體發酵，發酵溫度為32～38℃，發酵初始pH值味7.0～7.5，發酵時間為12～36h，所述枯草芽孢桿菌菌種種子培養液種量占甲魚蛋混合液體積的3～8％；

（6）向經步驟（5）液體發酵處理后的甲魚蛋混合液中加入乳酸菌菌種種子培養液，進行液體靜止發酵，發酵溫度為37～47℃，發酵初始pH值味6.0～6.5，發酵時間為12～24h，所述乳酸菌菌種種子培養液種量占甲魚蛋混合液體積的3～8％；

（7）將經步驟（6）液體靜止發酵處理后的甲魚蛋混合液升溫至70～98℃，維持10～20min，使菌種失活；冷卻至室溫，即得抗氧化肽液，灌裝保存。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟（5）液體發酵期間不斷攪拌、供氧。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（5）所述枯草芽孢桿菌菌種種子培養液的制備方法如下：將活化好的枯草芽孢桿菌斜面菌種單菌落接入滅菌后的種子培養基中，于旋轉搖床180～200r/min、32～38℃恒溫振蕩培養20～24h；所述種子培養基組分為：蛋白胨30g /L、NaCl 5g /L、牛肉膏5g/L及葡萄糖1g /L、pH 7.2，若種子培養基為固體培養基則還添加瓊脂 2.5g/L。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（6）所述乳酸菌菌種種子培養液的制備方法如下：將乳酸菌斜面菌種活化，連續傳代 5 次后接入 MRS 液體培養基，37 ℃靜止培養36 h；所述種子培養基組分為：牛肉膏 10 g/L、蛋白胨 10 g/L、酵母粉 5 g/L、葡萄糖 20 g/L、醋酸鈉 5 g/L、檸檬酸二銨 2 g/L、吐溫 80 0.1 g/L、硫酸鎂 0.58 g/L、硫酸錳 0.28 g/L、p H 6.2～6.4。