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[發(fā)明專利]一種具有良好熱穩(wěn)定性的葡萄糖氧化酶納米凝膠的制備方法有效

專利信息
申請(qǐng)?zhí)枺?/td> 201710527207.8 申請(qǐng)日: 2017-06-30
公開(公告)號(hào): CN107164359B 公開(公告)日: 2020-03-17
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 陶倩;柏良久;李桂英;薛眾鑫;王文香 申請(qǐng)(專利權(quán))人: 魯東大學(xué)
主分類號(hào): C12N11/082 分類號(hào): C12N11/082;C12N11/04
代理公司: 煙臺(tái)上禾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 37234 代理人: 鄭素娟
地址: 264025 山東*** 國省代碼: 山東;37
權(quán)利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 一種 具有 良好 熱穩(wěn)定性 葡萄糖 氧化酶 納米 凝膠 制備 方法
【權(quán)利要求書】:

1.一種具有良好熱穩(wěn)定性的葡萄糖氧化酶納米凝膠的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:

1)稱取單體、交聯(lián)劑和葡萄糖氧化酶溶解于MES緩沖溶液中制得混合溶液作為水相,控制水相中葡萄糖氧化酶的濃度為0.1-10mg/mL,所述單體與葡萄糖氧化酶的質(zhì)量之比為(100-250):1,交聯(lián)劑的量為單體質(zhì)量的1-3wt%,其中,所述單體是指N-異丙基丙烯酰胺或甲基丙烯酸N,N'-二甲氨基乙酯,所述的交聯(lián)劑是指N,N'-亞甲基雙丙烯酰胺、N,N'-乙烯基雙丙烯酰胺、二甲基丙烯酸乙二醇酯、二甲基丙烯酸二甘醇酯中的任意一種;

2)將表面活性劑加入到不溶于水的非極性或弱極性有機(jī)溶劑中,溶解后作為油相,所述的表面活性劑為二(2-乙基己基)琥珀酸酯磺酸鈉、聚乙二醇對(duì)異辛基苯基醚或十六烷基三甲基溴化銨中的任意一種;

3)在攪拌條件下,將水相逐滴加入到油相中,持續(xù)攪拌,得透明穩(wěn)定的微乳液體系,控制水相與油相的體積比為1:5-1:50,且微乳液中W0值為20;

4)向步驟3)所得的微乳液體系中加入水溶性的引發(fā)劑,引發(fā)聚合反應(yīng)并進(jìn)一步交聯(lián),控制反應(yīng)溫度為20-30℃,反應(yīng)時(shí)間為0.5-4h,形成包裹有葡萄糖氧化酶的納米凝膠,所述引發(fā)劑包括還原組分和氧化組分,還原組分的加入量為單體質(zhì)量的0.5-0.75wt%,氧化組分的加入量為還原組分質(zhì)量的1-4倍,所述還原組分是指亞硫酸鹽和亞鐵鹽中的任意一種,所述氧化組分是指過硫酸鹽、過氧化氫中的一種;

5)聚合反應(yīng)結(jié)束后,向反應(yīng)體系中加入MES緩沖溶液,打破反應(yīng)體系中的油水平衡,冷藏靜置,待油水界面清晰后去除油相,將水相轉(zhuǎn)移進(jìn)透析袋中,將透析袋中的產(chǎn)品至于MES緩沖溶液中透析48h以上,以去除表面活性劑和殘余單體,即得葡萄糖氧化酶納米凝膠;

其中,所述MES緩沖溶液是指2-(N-嗎啡啉)乙磺酸緩沖溶液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟1)中所述的交聯(lián)劑是指水溶性的具有雙官能團(tuán)的交聯(lián)劑。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟5)中加入MES緩沖溶液的體積為水相體積的3-8倍。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的制備方法,其特征在于,步驟2)中所述的有機(jī)溶劑為正己烷,環(huán)己烷,異辛烷,甲苯,石油醚中的任意一種。

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1、專利原文基于中國國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局專利說明書;

2、支持發(fā)明專利 、實(shí)用新型專利、外觀設(shè)計(jì)專利(升級(jí)中);

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