[發(fā)明專利]包含內(nèi)部標(biāo)記引物的核酸的測序、擴(kuò)增和檢測方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710523381.5 | 申請日: | 2012-05-04 |
| 公開(公告)號: | CN107190078A | 公開(公告)日: | 2017-09-22 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 弗蘭切斯卡·迪帕斯奎爾;丹尼爾·米勒 | 申請(專利權(quán))人: | 凱杰有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 中原信達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司11219 | 代理人: | 楊青,穆德駿 |
| 地址: | 德國*** | 國省代碼: | 暫無信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 包含 內(nèi)部 標(biāo)記 引物 核酸 擴(kuò)增 檢測 方法 | ||
1.內(nèi)部標(biāo)記的核酸引物在減少染料污跡中的應(yīng)用,其中所述核酸引物用于包括下列步驟的擴(kuò)增方法:
i)提供至少一種核酸引物,其包含至少一個標(biāo)記的核苷酸,
ii)提供沒有外切酶活性的DNA聚合酶和試劑,使用所述至少一種標(biāo)記的核酸引物來擴(kuò)增靶核酸,
iii)將反應(yīng)組分在適合于靶核酸引物擴(kuò)增的條件下溫育,
iv)通過標(biāo)記的核苷酸來檢測擴(kuò)增的核酸,
其中所述核酸引物包含下列序列:
5’-NaXNb-3’,
其中N可以是任意核苷酸,
其中“a”和“b”表示核苷酸的數(shù)量并且可以在1至150的范圍內(nèi),其中“a”和“b”相差5或更小,并且其中X是所述至少一個標(biāo)記的核苷酸。
2.內(nèi)部標(biāo)記的核酸引物在減少擴(kuò)增方法中出現(xiàn)的染料污跡中的應(yīng)用,所述擴(kuò)增方法包括下列步驟:
i)提供至少一種核酸引物,其包含至少一個標(biāo)記的核苷酸,
ii)提供酶和試劑,使用所述至少一種標(biāo)記的核酸引物來擴(kuò)增靶核酸,
iii)將反應(yīng)組分在適合于靶核酸引物擴(kuò)增的條件下溫育,
iv)通過標(biāo)記的核苷酸來檢測擴(kuò)增的核酸,
其中所述核酸引物包含下列序列:
5’-NaXNb-3’,
其中N可以是任意核苷酸,
其中“a”和“b”表示核苷酸的數(shù)量并且可以在1至150的范圍內(nèi),其中“a”和“b”相差5或更小,并且其中X是所述至少一個標(biāo)記的核苷酸。
3.權(quán)利要求1或2的應(yīng)用,其中步驟iv)包括按照大小分離所述擴(kuò)增的核酸的步驟。
4.權(quán)利要求1或2的應(yīng)用,其中標(biāo)記物通過核苷酸的環(huán)外氨基或2'-氨基連接到所述核苷酸。
5.權(quán)利要求1或2的應(yīng)用,其中“a”在3至25之間。
6.權(quán)利要求1或2的應(yīng)用,其中“b”在3至25之間。
7.權(quán)利要求1或2的應(yīng)用,其中“a”和“b”具有相同的值和/或為10。
8.權(quán)利要求1或2的應(yīng)用,其中所述核酸引物具有10至300nt的長度。
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