[發明專利]一種可同時檢測汞和銀離子的核酸適配體、試劑盒及方法

有效

• 申請號: 201710520128.4
• 申請日: 2017-06-30
• 公開（公告）號: CN107340279B
• 公開（公告）日: 2019-11-08
• 發明（設計）人: 陳愛亮;黃亞飛;閆嬌;朱超;章程輝
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;C12N15/115
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 李進

本發明涉及化學檢測技術領域，具體而言，本發明設計了一段核酸適配體序列，能夠同時結合汞和銀離子，并借助雙鏈DNA特異性染料，開發了一種能夠同時檢測汞和銀離子的檢測方法。本發明提供的核酸適配體在用于Hg²⁺和Ag⁺同時檢測時反應快速、靈敏度高、選擇性好。通過優化反應體系及反應條件，本申請在檢測Hg²⁺和Ag⁺時具有更高的靈敏度及更寬的線性范圍。

技術領域

本發明涉及化學檢測技術領域，具體而言，涉及一種可同時檢測汞和銀離子的核酸適配體、試劑盒及方法。

背景技術

汞離子(Hg²⁺)和銀離子(Ag⁺)是高毒性金屬離子和廣泛的環境污染物中的兩種，即使在低濃度下也會對環境和人造成嚴重的永久性的損害。更嚴重的是，通過污染水源，Ag⁺和Hg²⁺可以積累到農產品和水產品中，進入人類的食物鏈。Hg²⁺污染對人類有著極大的危害，人體無法通過自身的代謝排泄食物鏈或其他途徑積累在體內的微量汞，而微量汞在體內的積累將直接導致心臟、肝、甲狀腺等疾病，甚至導致神經系統紊亂、慢性中毒及智力障礙。納米銀有著特殊的殺菌、催化和光學特性，在電子、電鍍、感光等行業有著廣泛的應用，這些涉及銀的行業的生產和應用中會產生含銀的工業廢水，這種含銀廢水對環境的污染非常嚴重。在現有Ag⁺的環境中長時間暴露的情況下，人可能引起緩慢進行的物理和神經退行性疾病。因此，Hg²⁺和Ag⁺的檢測在環境監測，食品安全和臨床診斷領域非常重要。

汞能夠和胸腺嘧啶T形成T-Hg-T結構，銀離子能夠和胞嘧啶C形成C-Ag-C的結構，利用這一原理已經建立了一些基于DNA的用于檢測水，藥物，食品和臨床樣品中的Hg²⁺或Ag⁺檢測到方法。但是這些檢測都是單種金屬離子檢測。然而，Hg²⁺和Ag⁺通常共存于水，土壤甚至生物系統中，對于Hg²⁺和Ag⁺的共存系統，這些測定需要不同的檢測方法和實驗條件以同時檢測Hg²⁺和Ag⁺，這增加了這些測定的復雜性和不便。為了滿足實際樣品分析的實際需要，也有人建立能夠同時檢測Hg²⁺和Ag⁺的方法，然而這些方法在實際應用中遭受某些限制，例如使用掩蔽劑，低靈敏度和復雜性。因此，在實際樣品中實現Hg²⁺和Ag⁺的簡單和同時檢測仍然是一個巨大的挑戰。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的目的在于提供一種可同時檢測汞和銀離子的核酸適配體、包含該核酸適配體的試劑盒及同時檢測汞和銀離子的方法，以實現Hg²⁺和Ag⁺的簡單和同時檢測。

為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：

本發明一方面涉及一種可同時檢測汞和銀離子的核酸適配體，所述核酸適配體的序列如SEQ ID NO:1所示。

如上所述的核酸適配體的互補鏈如SEQ ID NO:2所示。

一種檢測汞和/或銀離子的試劑盒，所述試劑盒包括如上所述的核酸適配體和如上所述的互補鏈，以及雙鏈DNA結合熒光染料。

優選的，如上所述的試劑盒，所述雙鏈DNA結合熒光染料包括SYBR Green I、SYBRgold、EvaGreen、PicoGreen、Peko Green、EB、Genefinder、Calcein中的任一種。

一種檢測汞和/或銀離子的方法，包括：

1).將核酸適配體與待檢離子混合孵育；