[發(fā)明專利]一種可同時檢測汞和銀離子的核酸適配體、試劑盒及方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710520128.4
• 申請日: 2017-06-30
• 公開（公告）號: CN107340279B
• 公開（公告）日: 2019-11-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳愛亮;黃亞飛;閆嬌;朱超;章程輝
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;C12N15/115
• 代理公司: 北京超凡志成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 李進(jìn)

1.一種可同時檢測汞和銀離子的核酸適配體，其特征在于，所述核酸適配體的序列如SEQ ID NO: 1所示。

2.權(quán)利要求1所述的核酸適配體的互補(bǔ)鏈如SEQ ID NO: 2所示。

3.一種檢測汞和/或銀離子的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權(quán)利要求1所述的核酸適配體和權(quán)利要求2所述的互補(bǔ)鏈，以及雙鏈DNA結(jié)合熒光染料。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述雙鏈DNA結(jié)合熒光染料包括SYBRGreen I、SYBR gold、EvaGreen、PicoGreen、Peko Green、EB、Genefinder、Calcein中的任一種。

5.一種檢測汞和/或銀離子的方法，其特征在于，包括：

1）. 將權(quán)利要求1所述的核酸適配體與待檢離子混合孵育；

2）. 加入互補(bǔ)鏈和雙鏈DNA結(jié)合熒光染料進(jìn)行孵育；

3）. 檢測熒光值并將其代入預(yù)先建好的Hg²⁺和/或Ag⁺的濃度-熒光強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)曲線，從而得知待檢離子中Hg²⁺和/或Ag⁺的含量。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測汞和/或銀離子的方法，其特征在于，在所述核酸適配體與所述互補(bǔ)鏈的濃度均為0.07μM~0.13 μM的溶液。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測汞和/或銀離子的方法，其特征在于，在步驟1）中，所述核酸適配體的溶液與所述待檢離子的溶液的體積比為（2~3）：5。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的檢測汞和/或銀離子的方法，其特征在于，在步驟1）中，所述孵育的時間為8min~12min。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的檢測汞和/或銀離子的方法，其特征在于，在步驟2）中，所述DNA結(jié)合熒光染料為PicoGreen，且所述核酸適配體和所述互補(bǔ)鏈的總體積與所述PicoGreen的體積比為25：（4~10）。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的檢測汞和/或銀離子的方法，其特征在于，在步驟2）中，所述孵育的時間為2.5min~3.5min。