[發(fā)明專利]一種補(bǔ)肺活血膠囊HPLC指紋圖譜的構(gòu)建方法及標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710516710.3
• 申請(qǐng)日: 2017-06-29
• 公開（公告）號(hào): CN107505418B
• 公開（公告）日: 2020-03-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蘇薇薇;唐清;關(guān)澤明;關(guān)敏怡;朱曉梟;謝揚(yáng)輝;鄭玉瑩;彭維
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中山大學(xué);廣東雷允上藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/06
• 分類號(hào): G01N30/06;G01N30/02
• 代理公司: 廣州容大專利代理事務(wù)所(普通合伙) 44326
• 代理人: 劉新年;黃開艷

1.一種補(bǔ)肺活血膠囊HPLC指紋圖譜的構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)供試品溶液的制備：取補(bǔ)肺活血膠囊內(nèi)容物，精密稱定1.2g，精密加甲醇50ml，加熱回流1小時(shí)，放冷，用甲醇補(bǔ)足減失重量，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，回收溶劑至干，殘?jiān)?0％甲醇溶解，定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加50％甲醇至刻度，得供試品溶液；

(2)對(duì)照品溶液的制備：分別稱取毛蕊異黃酮葡萄糖苷、毛蕊異黃酮、芍藥苷、異補(bǔ)骨脂素、補(bǔ)骨脂素對(duì)照品適量，制成濃度為各50μg/ml的混合溶液；

(3)采用高效液相色譜法分析上述供試品溶液和對(duì)照品溶液，得到補(bǔ)肺活血膠囊高效液相色譜指紋圖譜，色譜條件為：色譜柱為日立高新技術(shù)C18；以乙腈為流動(dòng)相A，0.2％甲酸溶液為流動(dòng)相B；梯度洗脫，0-25min，16％A,84％B；25-65min，16-42％A，84-58％B；柱溫25℃；檢測(cè)波長(zhǎng)260nm，進(jìn)樣量10μl；

質(zhì)譜工作參數(shù)：離子噴霧電壓1500V；噴霧氣壓50psi；輔助加熱氣壓60psi；溫度550℃；氣簾氣壓15psi；碰撞氣壓8psi；入口電壓10V；采用電噴霧離子源，正離子模式進(jìn)行檢測(cè)。

2.一種補(bǔ)肺活血膠囊HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，其特征在于：按權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，通過對(duì)10批以上的補(bǔ)肺活血膠囊樣品構(gòu)建的HPLC指紋圖譜，進(jìn)行分析比較，找出其共有特征峰得到，共測(cè)出12個(gè)共有色譜峰，歸屬于黃芪的共有峰為4號(hào)峰、8號(hào)峰、10號(hào)峰，歸屬于赤芍的共有峰為2號(hào)峰、5號(hào)峰、6號(hào)峰、7號(hào)峰，歸屬于補(bǔ)骨脂的共有峰為1號(hào)峰、3號(hào)峰、9號(hào)峰、11號(hào)峰、12號(hào)峰。

3.一種補(bǔ)肺活血膠囊HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，其特征在于：按權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，通過對(duì)10批以上的補(bǔ)肺活血膠囊樣品構(gòu)建的HPLC指紋圖譜并進(jìn)行分析比較，利用DAD檢測(cè)器和超快液相色譜-四級(jí)桿串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)手段對(duì)主要峰進(jìn)行色譜峰歸屬及峰純度檢測(cè)，通過UV吸收曲線比較，結(jié)合質(zhì)譜的分子離子峰、裂解碎片信息鑒定：1號(hào)峰為補(bǔ)骨脂苷、2號(hào)峰為芍藥苷、3號(hào)峰為異補(bǔ)骨脂苷、4號(hào)峰為毛蕊異黃酮葡萄糖苷、5號(hào)峰為沒食子酰芍藥苷、6號(hào)峰為1,2,3,4,6-五沒食子酰葡萄糖、10號(hào)峰為毛蕊異黃酮、11號(hào)峰為補(bǔ)骨脂素、12號(hào)峰為異補(bǔ)骨脂素。