[發明專利]一種用于雞滑液囊支原體高密度培養的培養基及其制備方法

在審

• 申請號: 201710516303.2
• 申請日: 2017-06-29
• 公開（公告）號: CN108949605A
• 公開（公告）日: 2018-12-07
• 發明（設計）人: 丁美娟;張小飛;尹秀鳳;許秀梅;汪愛芬;嚴鵬
• 申請（專利權）人: 南京天邦生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/35
• 代理公司: 常州佰業騰飛專利代理事務所(普通合伙) 32231
• 代理人: 高姍

本發明公開了一種用于雞滑液囊支原體高密度培養的培養基，屬于生物技術領域，包括批培養基和補料培養基，批培養基包含下列組分：PPLO肉湯、水解乳蛋白、酵母浸出粉、煙酰胺、精氨酸、酚紅和豬血清；批培養基用NaOH溶液調pH值；補料培養基包含有下列組分：酵母浸出粉和葡萄糖；該培養基的制備方法包括如下步驟：培養發酵罐接種用種子培養基、批培養基批培養階段、補料培養基補料階段和菌液活菌量測定。本發明的培養基在不影響目的菌體生物學特性情況下，能顯著提高雞滑液囊支原體的培養密度，可減少試劑的消耗，節約成本。

技術領域

本發明涉及一種培養基及其制備方法，特別是涉及一種用于雞滑液囊支原體高密度培養的培養基及其制備方法，屬于生物技術領域。

背景技術

雞滑液囊支原體是禽支原體中最重要的致病性菌之一，可感染雞與火雞，主要引起關節滲出性的滑液囊膜炎及腱鞘滑膜炎，具有很強的傳染性，且常與細菌或病毒混合感染致病，對養雞業造成了巨大的經濟損失，防治MS主要采用藥物治療和免疫接種，但是藥物治療容易使雞滑液囊支原體產生耐藥性，因此疫苗免疫是控制該病更為有效的措施。

雞滑液囊支原體滅活疫苗的制備中，首要環節就是雞滑液囊支原體的培養，為了獲得理想的雞滑液囊支原體培養菌濃度，有必要開發出一種適用于用于雞滑液囊支原體高密度培養的培養基。

發明內容

本發明的主要目的是為了提供一種用于雞滑液囊支原體高密度培養的培養基及其制備方法，用于提高雞滑液囊支原體的培養密度，減少試劑的消耗，節約成本。

本發明的目的可以通過采用如下技術方案達到：

一種用于雞滑液囊支原體高密度培養的培養基，包括批培養基和補料培養基，所述批培養基在補料發酵階段添加所述補料培養基；

所述批培養基包含下列組分：PPLO肉湯、水解乳蛋白、酵母浸出粉、煙酰胺、精氨酸、酚紅和豬血清；

所述批培養基用NaOH溶液調pH值；

所述補料培養基包含有下列組分：酵母浸出粉和葡萄糖。

進一步的，每升所述批培養基包含下列配比組分：

PPLO肉湯：20.0～25.5g；

水解乳蛋白：5～8g；

酵母浸出粉：3～7g；

煙酰胺：0.3g；

精氨酸：2g；

酚紅：0.008g；

豬血清：200ml；

所述批培養基用20％NaOH調pH值至7.6～7.8。

進一步的，每升所述補料培養基包含有下列配比組分：

酵母浸出粉：3～7g/L；

葡萄糖：5g/L。

進一步的，所述批培養基是在分批發酵模式下單獨用于雞滑液囊支原體發酵培養的培養基。

進一步的，所述批培養基是在補料分批發酵模式下，與所述補料培養基聯用，用于雞滑液囊支原體發酵培養的培養基。

一種用于雞滑液囊支原體高密度培養的培養基的制備方法，采用fed-batch補料培養發酵模式，先采用發酵罐配制批培養基，發酵罐原位滅菌，再配制補料培養基，滅菌；所述制備方法具體包括如下步驟：

步驟1：培養發酵罐接種用種子培養基

采用所述批培養基，用凍存菌種接種，培養后調PH值，獲得一級種子液，再將一級種子液接種傳代一次獲得二級種子液，將二級種子接種到發酵罐的發酵培養基中，進行批培養；