[發(fā)明專利]一種用于磷酸肽富集和分離的離心式裝置

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710506881.8
• 申請日: 2017-06-28
• 公開（公告）號: CN107167542B
• 公開（公告）日: 2020-07-14
• 發(fā)明（設計）人: 錢小紅;秦偉捷;張萬軍;孫婕
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院放射與輻射醫(yī)學研究所
• 主分類號: G01N30/08
• 分類號: G01N30/08;G01N30/80
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;王春霞

1.一種富集和分離磷酸肽的方法，包括如下步驟：

(1)將含有磷酸肽的蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物加入至離心式富集裝置中的富集槍頭中，然后將富集槍頭與第一餾分收集器配合，將所述第一餾分收集器置于離心機中進行離心分離，即將所述磷酸肽富集于所述富集槍頭中的二氧化鈦填料中；

(2)將所述富集槍頭設置于分離槍頭內(nèi)，然后將所述分離槍頭與第二餾分收集器配合，采用不同乙腈含量的堿性洗脫液進行梯度洗脫，離心條件下，通過所述第二餾分收集器收集梯度洗脫的流穿液，即實現(xiàn)對所述磷酸肽的分離；

所述離心式富集裝置，包括所述富集槍頭、所述分離槍頭、所述第一餾分收集器和所述第二餾分收集器；

所述富集槍頭內(nèi)填充有固相萃取膜片A和二氧化鈦填料，所述固相萃取膜片A上覆蓋有八烷基膜，所述固相萃取膜片A靠近所述富集槍頭的出液口，

所述分離槍頭內(nèi)填充有固相萃取膜片B和C18反相填料，所述固相萃取膜片B上覆蓋有十八烷基膜，所述固相萃取膜片B靠近所述分離槍頭的出液口；

所述富集槍頭可設置于所述分離槍頭內(nèi)；

所述富集槍頭可與所述第一餾分收集器配合，所述分離槍頭可與所述第二餾分收集器配合。

2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于：所述富集槍頭和所述分離槍頭均為移液器槍頭。

3.根據(jù)權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述富集槍頭內(nèi)設置一層所述八烷基膜；

所述二氧化鈦填料的用量為1～10mg。

4.根據(jù)權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述分離槍頭內(nèi)設置3層所述十八烷基膜；

所述C18反相填料的用量為1～10mg。

5.根據(jù)權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述分離槍頭的規(guī)格小于所述富集槍頭的規(guī)格。

6.根據(jù)權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述富集槍頭通過適配器與所述第一餾分收集器配合；

所述分離槍頭通過適配器與所述第二餾分收集器配合。

7.根據(jù)權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述第一餾分收集器和所述第二餾分收集器均為離心管。