[發(fā)明專利]RNAi干擾片段、干擾載體及其制備方法和應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710506560.8 | 申請日： | 2017-06-27 |
| 公開（公告）號： | CN107267511B | 公開（公告）日： | 2020-06-16 |
| 發(fā)明（設計）人： | 賈斌;李超程;杜迎春 | 申請（專利權）人： | 石河子大學 |
| 主分類號： | C12N15/113 | 分類號： | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/66;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京鼎佳達知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 11348 | 代理人： | 王偉鋒;劉鐵生 |
| 地址： | 832003 新疆維*** | 國省代碼： | 新疆;65 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | rnai 干擾 片段 載體 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種RNAi干擾片段，其特征在于：
所述的RNAi干擾片段的核苷酸序列為：
F: 5'-TGTGA GGACT ACCTT ATGAT TTCAA GAGAA TCATA AGGTA GTCCT CACTT TTTTC-3'，
R:5'-TCGAG AAAAA AGTGA GGACT ACCTT ATGAT TCTCT TGAAA TCATA AGGTA GTCCTCACA-3'，
所述的RNAi干擾片段用于干擾馬鹿X染色體上的
2.一種RNAi干擾片段的應用，其特征在于：
根據(jù)權利要求1所述的一種RNAi干擾片段，所述的RNAi干擾片段用于制備控制馬鹿性別的藥物或試劑盒。
3.一種RNAi干擾載體，其特征在于：
所述的RNAi干擾載體具有權利要求1所述的RNAi干擾片段，
所述的RNAi干擾載體用于干擾馬鹿X染色體上的
4.根據(jù)權利要求3所述的一種RNAi干擾載體，其特征在于：
所述的RNAi干擾載體為pLentiLox3.7載體經(jīng)酶切后與所述RNAi干擾片段連接。
5.一種RNAi干擾載體的應用，其特征在于：
所述的RNAi干擾載體在馬鹿受精前用于性別控制，所述的RNAi干擾載體為權利要求3-4任一項所述。
6.根據(jù)權利要求5所述的一種RNAi干擾載體的應用，其特征在于：
所述RNAi干擾載體以睪丸直接注射的方式注射至馬鹿體內(nèi)，用于干擾馬鹿X染色體上的
7.一種RNAi干擾載體的制備方法，其特征在于：
所述的RNAi干擾載體的制備方法包括以下步驟，
酶切pLentiLox3.7載體；
將所述RNAi干擾片段與酶切后的所述pLentiLox3.7載體連接，得到連接產(chǎn)物，其中，所述RNAi干擾片段如權利要求1所述；
將所述連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化至感受態(tài)細胞中，并篩選出陽性克隆菌液；
對陽性克隆菌液進行測序鑒定，并將測序結果與所述RNAi干擾片段序列完全一致的菌液進行擴增；
從所述擴增的菌液中提取RNAi干擾載體。
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