[發明專利]肉制品中微生物的檢測的方法以及新型混合液

在審

• 申請號: 201710504987.4
• 申請日: 2017-06-28
• 公開（公告）號: CN109136324A
• 公開（公告）日: 2019-01-04
• 發明（設計）人: 朱敏;翟斌;劉歡;云美峰;熊新興;張號妮
• 申請（專利權）人: 西安市宇馳檢測技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/14
• 分類號: C12Q1/14;C12Q1/06;C12R1/25;C12R1/46;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.肉制品中微生物檢測的新型混合液，其特征在于，混合液為混合勻漿液由如下物質混合而成，氯化鈉、茶粉、司盤-80、吐溫-80、辛葵酸甘油酯、單硬脂酸甘油酯、甘油及水。

2.如權利要求1所述的肉制品中微生物檢測的新型混合液，其特征在于，所述混合勻漿液包含混合勻漿液包括：2~8g/L氯化鈉；1~3g/L茶粉；2~8g/L司盤-80；1~5g/L吐溫-80；2~5g/L辛葵酸甘油酯；1~5g/L單硬脂酸甘油酯；10~20g/L甘油以及余量的水。

3.肉制品中微生物檢測的新型混合液的制備方法，其特征在于，將2~8g/L氯化鈉；1~3g/L茶粉；2~8g/L司盤-80；1~5g/L吐溫-80；2~5g/L辛葵酸甘油酯；1~5g/L單硬脂酸甘油酯；10~20g/L甘油以及余量的水混合組成混合液；

混合液水浴（55~60℃）加熱，充分溶解后，用高速分散器勻漿3次(4500rpm，每次20s)，室溫下靜止15min后，用水定容至1L；定容后的混合液在200~300bar壓力下進行均質，將所得到的混合勻漿液進行121℃滅菌20~30min，得到混合勻漿液。

4.如權利要求1所述的新型混合液在檢測微生物中的用途。

5.茶粉、司盤-80、辛葵酸甘油酯、單硬脂酸甘油酯、甘油中任意一種以及數種在檢測微生物中的用途。

6.肉制品中微生物檢測的方法，其特征在于，

所述混合勻漿液包含混合勻漿液包括：2~8g/L氯化鈉；1~3g/L茶粉；2~8g/L司盤-80；1~5g/L吐溫-80；2~5g/L辛葵酸甘油酯；1~5g/L單硬脂酸甘油酯；10~20g/L甘油以及余量的水；

混合勻漿液替代常規實驗中的生理鹽水，將肉制品試樣足量加入滅菌的混合勻漿液中，充分混合后，取其混合液作為待測液，將待測液接種于培養基中進行培養，對培養后得到的菌落進行計數，確定肉制品中微生物的含量。

7.肉制品中乳酸菌檢測的方法，其特征在于，

混合勻漿液包括：2~8g/L氯化鈉；1~3g/L茶粉；2~8g/L司盤-80；1~5g/L吐溫-80；2~5g/L辛葵酸甘油酯；1~5g/L單硬脂酸甘油酯；10~20g/L甘油以及余量的水；

肉制品選擇為發酵肉制品；微生物選擇為乳酸菌；培養基選擇為MRS培養基；

MRS培養基配方：蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏5g、葡萄糖20g、硫酸鎂0.58g、檸檬酸氫二銨2g、磷酸氫二鉀2g、乙酸鈉5g、硫酸錳0.25g、吐溫1mL、瓊脂20g，去離子水1000mL，pH6.2~6.6，121℃滅菌20min；

①在無菌環境下，將肉制品試樣足量加入已滅菌的混合勻漿液中，室溫230 r/min搖床搖1 h，將混合液，待用；

②將活化好的乳酸菌菌懸液按1：100（v/v）與上述混合液混合，制成混合樣液；

③取1mL混合樣液，加入到9mL混合勻漿液中，依次稀釋，取不同稀釋梯度的稀釋液分別涂布于MRS固體培養基中培養；實驗重復三次，每次三個平行樣品；

④取1mL菌懸液加入到9mL生理鹽水中，依次稀釋，取不同稀釋梯度的稀釋液分別涂布于MRS固體培養基中培養；實驗重復三次，每次三個平行樣品；

⑤對混合樣液稀釋培養形成的菌落進行計數，取平均值并計算出發酵肉制品中乳酸菌含量的實測值；

⑥對菌懸液稀釋培養形成的菌落進行計數，取平均值并計算出發酵肉制品中乳酸菌含量的理論值；

⑦通過對發酵肉制品中乳酸菌含量的理論值和實測值進行對比。