[發(fā)明專利]一種檢測氟喹諾酮類藥物的方法

有效

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• 申請日: 2017-06-28
• 公開（公告）號: CN107688010B
• 公開（公告）日: 2019-12-03
• 發(fā)明（設計）人: 楊亞玲;王蒙;華建豪
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種基于磁性納米材料-碳量子點熒光增敏檢測氟喹諾酮類藥物的方法，其特征在于：具體步驟如下：

(1) 標準工作曲線的繪制：采用檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液配置8個濃度在0.01～20μg/L范圍內(nèi)的氟喹諾酮類藥物標準溶液，加入水溶性硫摻雜熒光碳量子點溶液，用檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液定容至5mL，渦旋混勻靜置后，在高效液相色譜條件下進樣分析檢測，以色譜峰面積對其相應濃度作圖進行回歸分析，即得到標準工作曲線，由此得到氟喹諾酮類藥物的線性回歸方程；

(2) 樣品制備：取30-35mL牛奶于具塞離心管中水浴加熱至40-45℃，攪拌下緩慢加入0.5-1.0mol/L HCl，調(diào)節(jié)pH至4.7-5.0，得到混懸液，待上述混懸液冷卻至室溫后，于5000r/min轉(zhuǎn)速下離心10 min，取上清液，避光保存于4 ℃冰箱待分析測定；

(3) 樣品測定：在步驟(2)制備的上清液加入磁性納米材料，渦旋使其充分混勻后，通過外加磁鐵進行磁分離，棄去磁性納米材料，取出上清液1-2mL，加入水溶性硫摻雜熒光碳量子點溶液，用檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液調(diào)pH并定容至5mL，渦旋混勻靜置后，經(jīng)0.45μm水相濾膜過濾后，在高效液相色譜條件下進樣分析檢測，代入步驟(1)線性回歸方程，計算出樣品中氟喹諾酮類藥物的含量；

所述水溶性硫摻雜熒光碳量子點的制備方法為稱取3.0-5.0g聚(4-苯乙烯磺酸-共聚-馬來酸)鈉鹽，加入到100 mL超純水中，超聲5-10min，使其充分混勻形成無色透明液體，并轉(zhuǎn)移至聚四氟乙烯反應釜，于220-250℃加熱5-8h，自然冷卻至室溫后，先用孔徑為0.22μm濾膜過濾，后用截留分子量為3000-3500Da的透析袋進行透析處理24 h，得到水溶性硫摻雜熒光碳量子點，并避光保存于4℃下，備用。

2.根據(jù)權利要求1所述的基于磁性納米材料-碳量子點熒光增敏檢測氟喹諾酮類藥物的方法，其特征在于：磁性納米材料的制備方法為稱取2.05-2.50g硫酸亞鐵銨和1.41-2.00g三氯化鐵，用50 mL去離子水溶解后，氮氣保護下，水浴加熱至75-85℃后，加入5-7mL體積百分比濃度28%的氨水，繼續(xù)攪拌反應30 min，冷卻至室溫，用去離子水洗滌3次，在外加磁鐵作用下分離，即得磁性Fe₃O₄。

3.根據(jù)權利要求1所述的基于磁性納米材料-碳量子點熒光增敏檢測氟喹諾酮類藥物的方法，其特征在于：氟喹諾酮類藥物為左氧氟沙星、諾氟沙星、洛美沙星、加替沙星中一種或幾種。

4.根據(jù)權利要求1所述的基于磁性納米材料-碳量子點熒光增敏檢測氟喹諾酮類藥物的方法，其特征在于：檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液pH為6.0-7.0。

5.根據(jù)權利要求1所述的基于磁性納米材料-碳量子點熒光增敏檢測氟喹諾酮類藥物的方法，其特征在于：磁性納米材料用量為5-25 mg。

6.根據(jù)權利要求1所述的基于磁性納米材料-碳量子點熒光增敏檢測氟喹諾酮類藥物的方法，其特征在于：水溶性硫摻雜熒光碳量子點用量為300μL。

7.根據(jù)權利要求1所述的基于磁性納米材料-碳量子點熒光增敏檢測氟喹諾酮類藥物的方法，其特征在于：渦旋混勻靜置是指渦旋混勻0.5-3 min，然后靜置5-10min。

8.根據(jù)權利要求1所述的基于磁性納米材料-碳量子點熒光增敏檢測氟喹諾酮類藥物的方法，其特征在于，高效液相色譜條件為：固定相C₁₈色譜柱，流動相梯度洗脫，0 min：乙腈-0.5%磷酸溶液，其中乙腈-0.5%磷酸溶液是乙腈和質(zhì)量濃度0.5%的磷酸溶液按體積比15:85混合制得；12 min：乙腈-0.5%磷酸溶液，其中乙腈-0.5%磷酸溶液是乙腈和質(zhì)量濃度0.5%的磷酸溶液按體積比35:65混合制得；流速1.0 mL/min；進樣量為20 μL；柱溫：30 ℃；熒光檢測器：激發(fā)波長290 nm，發(fā)射波長490 nm。