[發(fā)明專利]一種生物標(biāo)記物、采樣方法、建模方法及其用途

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• 申請日: 2017-06-27
• 公開（公告）號: CN107300613A
• 公開（公告）日: 2017-10-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 喻德華;曹艷華
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳市優(yōu)圣康生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/48
• 分類號: G01N33/48;G06F19/00
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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及生物標(biāo)志物、采樣方法、建模方法及其用途。

背景技術(shù)

肺癌是目前中國發(fā)病率最高的惡性腫瘤之一，其死亡率也居高不下。據(jù)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院腫瘤研究所陳萬青等發(fā)表在國際權(quán)威醫(yī)學(xué)期刊雜志《CA-Cancer JClin》的《2015年中國癌癥統(tǒng)計》，2015年中國約有429.2萬癌癥新發(fā)病例，281.4萬癌癥死亡病例。其中，肺癌以新發(fā)病例73.3萬例(占整體17.1％)、死亡病例61萬例(占整體21.1％)，成為中國人罹癌或因癌致死的最大威脅。

在臨床實踐中，肺癌早期診斷一直是難點，癌癥的早期發(fā)現(xiàn)對癌癥患者的有效治療是非常重要的。肺癌生存率高度依賴于診斷發(fā)現(xiàn)的階段，早期診斷從而可以早期治療，將可大大提高5年生存率。目前對于癌癥的診斷主要依據(jù)臨床癥狀、影像學(xué)檢測和組織病理學(xué)檢查等，但有許多癌癥的臨床癥狀出現(xiàn)較晚，并且活體取樣檢測也困難，嚴(yán)重影響了癌癥的早期診斷和病人的預(yù)后。相對于組織活檢，血漿、痰液、肺泡灌洗液等標(biāo)本容易獲得，且對病人也沒有創(chuàng)傷。目前，在外周循環(huán)血中，特定蛋白的表達(dá)異常、特定基因異常DNA甲基化、某些miRNA異常表達(dá)等等都可能是由癌癥導(dǎo)致的。因此對這些特殊因素的分析和檢測也為肺癌的早期診斷提供了幫助。

外周血是機體絕大多數(shù)蛋白、因子等的終末匯集處，機體的任何一種損傷或者應(yīng)激都有可能導(dǎo)致許多蛋白、因子表達(dá)不穩(wěn)定，因此單一檢測外周血中某一種因子對肺癌的診斷的靈敏度和特異性均差強人意。目前臨床上以大分子癌癥標(biāo)記物的單一或聯(lián)合使用作為癌癥診斷手段的研究較多，而對小分子類癌癥標(biāo)記物缺乏系統(tǒng)深入的探討。

SFTPB(surfactant protein B)的前體pro-SFTPB,是由2型肺泡壁細(xì)胞和非纖毛細(xì)支氣管細(xì)胞合成一個親水性的42kD蛋白。合成過程中，pro-SFTPB在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中迅速被半胱氨酸蛋白酶溶蛋白性裂解，得到一個分泌型的9kD非膠原區(qū)疏水性SFTPB，這是SFTPB的成熟有功能的形式。肺癌細(xì)胞，尤其是肺腺癌，通常伴有SFTPB合成調(diào)節(jié)異常，前體轉(zhuǎn)變?yōu)橛谐墒斓氖杷问降鞍椎倪^程減緩，導(dǎo)致pro-SFTPB的過表達(dá)。研究證實在非小細(xì)胞肺癌患者中檢測到循環(huán)成熟的SFTPB水平高于正常人。SFTPB、Pro-SFTPB可以作為檢測非小細(xì)胞肺癌的診斷靶標(biāo)。

代謝組學(xué)是系統(tǒng)生物學(xué)中的一個重要組成部分，研究對象是機體內(nèi)的終端小分子代謝物(通常指分子量小于1000Da)的變化規(guī)律的科學(xué)。其從整體上對某一生物體組分或細(xì)胞在一特定生理時期或條件下所有代謝產(chǎn)物同時進(jìn)行定性和定量分析，儀尋找出目標(biāo)差異代謝物。可用于疾病早期診斷、藥物靶點發(fā)現(xiàn)、疾病機理研究及疾病診斷等。代謝組學(xué)分析的樣本主要是尿液和血液，其采集過程對人體無傷害。多胺類化合物是小的陽離子分子，通常認(rèn)為是與正常細(xì)胞和癌細(xì)胞調(diào)節(jié)關(guān)鍵代謝酶相關(guān)。多胺類小分子包括1,3-丙二胺、腐胺、尸胺、精胺、酰化精胺、精脒、酰化精脒等。在正常的哺乳動物細(xì)胞內(nèi)這類小分子物質(zhì)是必不可少的，且其含量由一系列復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控，包括合成、降解、和運輸。在上皮性腫瘤中多胺類化合物也收原癌基因和腫瘤抑制基因的調(diào)節(jié)。目前尚未能有充分證據(jù)證實何種多胺為癌癥的生物標(biāo)記物，也無肺癌特異性標(biāo)記物，這大大影響了肺癌輔助診斷、預(yù)后和療效評估指標(biāo)等。

目前尚未能有充分證據(jù)證實SFTPB、pro-SFTPB和N¹，N¹²-二乙酰精胺在癌癥預(yù)測中的意義，僅有單個生物標(biāo)記物對癌癥檢測的研究，而其靈敏度和特異性都不高。本發(fā)明的這個組合結(jié)合了生物標(biāo)記物的特性，優(yōu)化組合，從而為癌癥預(yù)測提供了幫助。

目前僅有對SFTPB、pro-SFTPB和N1，N12-二乙酰精胺其中某一種生物標(biāo)記物進(jìn)行檢測的研究，各指標(biāo)的檢測手法單一，不能滿足多種樣本類型的需求，且其結(jié)果對癌癥的預(yù)測的靈敏度和特異性均不佳。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于解決現(xiàn)有肺癌診斷標(biāo)記物單一，靈敏度和特異性均不佳的現(xiàn)狀，提供新型生物標(biāo)記物、采樣方法、建模方法及其用途。

一種生物標(biāo)記物，所述標(biāo)記物為SFTPB(surfactant protein B，表面蛋白B)、pro-SFTPB(pro-surfactant protein B，表面蛋白B前體)、N¹，N¹²-二乙酰精胺(N¹，N¹²-diacetylspermine)的任一種或其組合。