[發明專利]一種氮摻雜碳量子點熒光增敏檢測環丙沙星的方法

有效

• 申請號: 201710501072.8
• 申請日: 2017-06-27
• 公開（公告）號: CN107490565B
• 公開（公告）日: 2019-12-03
• 發明（設計）人: 楊亞玲;胡楓;楊德志
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種氮摻雜碳量子點熒光增敏檢測環丙沙星的方法；本發明采用豆奶為碳源及氮源，一步水熱法合成高熒光量子產率的氮摻雜熒光碳量子點；氮摻雜熒光碳量子點能增強環丙沙星的熒光，其增強的熒光信號強度與環丙沙星濃度呈一定線性關系，據此建立了檢測環丙沙星的熒光分光光度法；本發明制備的氮摻雜熒光碳量子點對環丙沙星有顯著的熒光增敏作用，且選擇性強，用于環丙沙星的熒光測定，具有靈敏度高、特異性的特點。

技術領域

本發明涉及化學分析檢測技術領域，更具體的是一種氮摻雜碳量子點熒光增敏檢測環丙沙星的方法。

背景技術

環丙沙星又稱環丙氟哌酸，屬于化學合成的氟喹諾酮類抗菌藥。該藥抗菌譜廣，殺菌作用力強，毒性低，對革蘭氏陰性菌、支原體具有強大而穩定的殺滅作用，對革蘭氏陽性菌、衣原體等致病菌也有良好的抗菌作用，適用于治療畜禽慢性呼吸道疾病、支原體病、大腸桿菌病、沙門氏菌病、巴氏桿菌病等。環丙沙星以口服和注射均吸收迅速，體內分布廣，生物利用度高、毒性較低，且無交叉耐藥性等優點而備受歡迎。其含量常用的測定方法有紫外分光光度法，高效液相色譜法，流動注射化學發光法，熒光光度法。其中熒光光度法目前報道的測定方法主要集中在：(1)利用環丙沙星本身的自然熒光進行測定，但靈敏度較低；后來有人報道表面活性劑對環丙沙星的自然熒光有較強的增敏作用，建立了膠束增敏熒光光譜法測定環丙沙星；(2)利用環丙沙星能與某些稀土離子或金屬離子形成配合物進行測定。

碳量子點是一類粒徑一般小于10nm的新型碳材料。它具有優異的光學性能，可調的激發和發射行為，較高的熒光穩定性，較低的毒性和良好的生物相容性，在越來越多的領域中得到了廣泛的應用，逐漸成為納米碳材料中的一顆新星。目前，人們致力于探索制備高量子產率碳點的方法。碳量子點經過摻雜或者表面鈍化后,其熒光量子產率以及光電性能均可以得到明顯的提高。最近幾年,有很多關于氮元素摻雜碳量子點的文獻報道,碳量子點的熒光量子產率均得到了提高；本發明提供的高靈敏、高選擇性技術方案目前尚未見報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一種高靈敏、高選擇性的氮摻雜碳量子點熒光增敏檢測環丙沙星的方法。

本發明氮摻雜碳量子點熒光增敏檢測環丙沙星的方法包括如下步驟：

（1）標準工作曲線的繪制：在0.05～20 μmol/L的線性范圍內，采用醋酸-醋酸鈉緩沖液配置8個不同濃度梯度的環丙沙星標準溶液，并定容至5 mL，然后加入一定量的水溶性氮摻雜熒光碳量子點溶液，渦旋混勻靜置后，于熒光分光光度計上，激發波長為350nm，發射波長為425nm測定熒光強度，以熒光增強強度對其相應濃度作圖進行回歸分析，即可得到標準工作曲線，由此可得到環丙沙星的線性回歸方程與其相關系數；

（2）樣品制備

蜂蜜樣品：稱取蜂蜜2.00-5.00g置于離心管中，加入水、pH =4磷酸鹽緩沖液總量5-10mL，渦旋1-3min，加入質量濃度5%的乙酸乙腈溶液至50mL渦旋5-10min后加入無水硫酸鎂5g渦旋1-3min，5000 r /min離心5-10 min，吸取上清液備用，其中水與pH =4磷酸鹽緩沖液的體積比為2-4:1；

肉制品樣品：稱取2.00-5.00g樣品置于離心管中，加入pH=7的0.1 M磷酸緩沖液5-10mL，勻漿1 -3min，5000 r /min 離心5-10 min，分取上清液于另一試管中，再用pH = 7的0.1 M磷酸緩沖液10-15 mL洗勻漿機刀頭及離心管內殘渣，勻漿1-3min，一并轉入離心管中，5000 r /min 離心5-10min，合并兩次上清液，混勻、備用；

奶制品樣品：取5-10 mL奶樣，加入10-15mL甲醇-水-甲酸提取液、l-3 mL 質量濃度4％的三氯乙酸乙腈溶液，渦旋1-3 min，超聲5-10 min，10000r/min下離心5-10 min，取上清液備用；其中甲醇-水-甲酸提取液是按體積比28:72:0.1的比例將甲醇、水、甲酸混勻制得；