[發明專利]一種氮摻雜碳量子點熒光增敏檢測環丙沙星的方法

有效

• 申請號: 201710501072.8
• 申請日: 2017-06-27
• 公開（公告）號: CN107490565B
• 公開（公告）日: 2019-12-03
• 發明（設計）人: 楊亞玲;胡楓;楊德志
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種氮摻雜碳量子點熒光增敏檢測環丙沙星的方法，其特征在于，具體步驟如下：

（1）標準工作曲線的繪制：采用醋酸-醋酸鈉緩沖液，并定容至5 mL，配置8個濃度在0.05-20 μmol/L范圍內的環丙沙星標準溶液，然后加入水溶性氮摻雜熒光碳量子點溶液，渦旋混勻靜置后，于熒光分光光度計上，激發波長為350nm，發射波長為425nm測定熒光強度，以熒光增強強度對其相應濃度作圖進行回歸分析，即得到標準工作曲線，由此得到環丙沙星的線性回歸方程；

（2）樣品制備

蜂蜜樣品：稱取蜂蜜2.00-5.00g置于離心管中，加入水、pH =4磷酸鹽緩沖液總量5-10mL，渦旋1-3min，加入質量濃度5%的乙酸乙腈溶液至50mL渦旋5-10min后加入無水硫酸鎂5g渦旋1-3min，5000 r /min離心5-10 min，吸取上清液備用，其中水與pH =4磷酸鹽緩沖液的體積比為2-4:1；

肉制品樣品：稱取2.00-5.00g樣品置于離心管中，加入pH=7的0.1 M磷酸緩沖液5-10mL，勻漿1-3min，5000 r /min 離心5-10 min，分取上清液于另一試管中，再用pH = 7的0.1 M磷酸緩沖液10-15 mL洗勻漿機刀頭及離心管內殘渣，勻漿1-3min，一并轉入離心管中，5000 r /min 離心5-10min，合并兩次上清液，混勻、備用；

奶制品樣品：取5-10 mL奶樣，加入10-15mL甲醇-水-甲酸提取液、l-3 mL質量濃度的4％三氯乙酸乙腈溶液，渦旋1-3 min，超聲5-10 min，10000r/min下離心5-10 min，取上清液備用；其中甲醇-水-甲酸提取液是按體積比28:72:0.1的比例將甲醇、水、甲酸混勻制得；

（3）樣品測定：取步驟、步驟、步驟制備的上清液或水樣2-3mL，用醋酸-醋酸鈉緩沖液調pH至弱酸性并定容至5mL，加入水溶性氮摻雜熒光碳量子點溶液，渦旋混勻靜置后，于熒光分光光度計上，激發波長為350nm，發射波長為425nm測定熒光強度，代入步驟（1）回歸方程，計算出樣品中環丙沙星的含量；

所述水溶性氮摻雜熒光碳量子點的制備方法為稱取2.0-5.0g豆奶加入到100mL超純水中，超聲5min形成白色懸濁液，并轉移至聚四氟乙烯反應釜，于200-220℃加熱12-16h，自然冷卻后，先用孔徑為0.22μm濾膜過濾，然后用截留分子量為3000-3500Da 的透析袋進行透析處理24h，得到水溶性氮摻雜熒光碳量子點。

2.根據權利要求1所述的氮摻雜碳量子點熒光增敏檢測環丙沙星的方法，其特征在于：醋酸-醋酸鈉緩沖液的pH為4-6。

3.根據權利要求1所述氮摻雜碳量子點熒光增敏檢測環丙沙星的方法，其特征在于：水溶性氮摻雜熒光碳量子點溶液用量為100μL。

4.根據權利要求1所述的氮摻雜碳量子點熒光增敏檢測環丙沙星的方法，其特征在于：步驟（1）和步驟（3）中渦旋混勻時間為0.5-2 min。

5.根據權利要求1所述氮摻雜碳量子點熒光增敏檢測環丙沙星的方法，其特征在于：步驟（1）和步驟（3）中靜置時間為10-20 min。