[發(fā)明專(zhuān)利]利用CRISPR-CAS9技術(shù)敲除NRK細(xì)胞Slc22a2基因的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710496608.1
• 申請(qǐng)日: 2017-06-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107177631B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-11-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許文濤;羅云波;祁瀟哲;黃昆侖;朱麗葉;賀曉云
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/85
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/85;C12N5/10;C12N15/113
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君;黃爽

1.Slc22a2基因敲除的NRK細(xì)胞系作為細(xì)胞模型在研究OCT2蛋白對(duì)OTA轉(zhuǎn)運(yùn)功能中的應(yīng)用，其中，Slc22a2基因敲除的NRK細(xì)胞系的構(gòu)建方法包括：根據(jù)大鼠Slc22a2基因序列，構(gòu)建基于CRISPER-Cas9系統(tǒng)的gRNA表達(dá)載體，以此作為Slc22a2基因打靶載體，轉(zhuǎn)入NRK細(xì)胞中，獲得Slc22a2基因敲除的NRK細(xì)胞；

其中，gRNA作用位點(diǎn)位于大鼠Slc22a2基因的2號(hào)外顯子上，gRNA作用位點(diǎn)的DNA序列為5′-TTTCAGTCAGTAGTGAACGT-3′；

所述表達(dá)載體的出發(fā)載體為pX458。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述NRK細(xì)胞為NRK-52E。