[發明專利]一種羅氏沼蝦螺原體可視化快速檢測試劑盒及方法

有效

• 申請號: 201710491995.X
• 申請日: 2017-06-26
• 公開（公告）號: CN107254527B
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發明（設計）人: 潘曉藝;藺凌云;徐洋;袁雪梅;沈錦玉;姚嘉赟;尹文林
• 申請（專利權）人: 浙江省淡水水產研究所
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01
• 代理公司: 成都天匯致遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51264
• 代理人: 韓曉銀

1.一種羅氏沼蝦螺原體可視化快速檢測試劑盒，其特征在于，包括螺原體DNA提取試劑和反應試劑，所述反應試劑包括以下組分：

a）預反應液：20mM pH為8.8的Tris-HC1、8mM硫酸鎂、15mM氯化鉀、10mM硫酸銨 、0.l2%Tween-20、1.4 mM dNTP、0.5 M甜菜堿、0.2μM引物MrSpi-P1、0.2μM引物MrSpi-B1、1.6μM引物MrSpi-P2、1.6μM引物MrSpi-B2、0.8μM引物MrSpi-P3和0.8μM引物MrSpi-B3；

所述的引物MrSpi-P1的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；

所述的引物MrSpi-B1的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；

所述的引物MrSpi-P2的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；

所述的引物MrSpi-B2的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；

所述的引物MrSpi-P3的核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示；

所述的引物MrSpi-B3的核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示；

b）反應酶：每微升含8個活性單位的Bst 2.0 DNA聚合酶；

c）反應封閉液：由礦物油或液體石蠟油組成；

d）反應顯色液：含有10 % SYBR Green I的熒光染料。

2.根據權利要求1所述的羅氏沼蝦螺原體可視化快速檢測試劑盒，其特征在于，所述螺原體DNA提取試劑的成分為60mM Tris、800mM NaCl、20mM EDTA、1%體積百分比 NP-40的pH8.0的裂解液。