[發明專利]一種PSI-OAm-NAPI兩親聚合納米材料的定量檢測方法

有效

• 申請號: 201710489336.2
• 申請日: 2017-06-24
• 公開（公告）號: CN107328929B
• 公開（公告）日: 2019-06-04
• 發明（設計）人: 張明翠;閆希
• 申請（專利權）人: 安徽師范大學
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535;G01N33/541;G01N21/31
• 代理公司: 蕪湖安匯知識產權代理有限公司 34107
• 代理人: 尹婷婷

本發明公開了一種PSI?OAm?NAPI兩親聚合納米材料的定量檢測方法，該法通過在抗原抗體(一抗)特異性結合的基礎上加入酶標二抗使其與抗原一抗的復合物結合，使特異性進一步加強，并將免疫學反應中抗原抗體的高特異性和酶催化反應的專一性相結合，并通過酶促反應的放大作用來提高免疫反應的信號，提高了實驗分析的靈敏度，該方法特異性強、靈敏度高，是一種快速、簡便的高通量測定方法。

技術領域

本發明涉及一種PSI-OAm-NAPI兩親聚合納米材料的定量檢測方法，具體涉及一種基于二抗的放大作用檢測PSI-OAm-NAPI兩親聚合納米材料的免疫分析方法。

背景技術

癌癥、心血管疾病、糖尿病已成為威脅人類生命安全的三大殺手。面對龐大的癌癥數量和死亡人數，現階段治療癌癥的主要手段是外科手術治療、放射療法和化學療法等。對于化學療法而言，這些手段過程痛苦，難以達到預期效果，并且具有很強的依賴性。像放射療法，在殺死癌細胞的同時不可避免的破壞了正常組織細胞，使免疫力降低。而使用納米載藥系統用于腫瘤的治療時，其納米尺度的特征在腫瘤治療中產生了重大意義。

聚合物膠體這是近幾年正在發展的一類新型的納米載體。有目標地合成水溶性嵌段共聚物使之同時具有親水性基因和疏水性基因，在水中溶解后自發形成高分子膠束，從而完成對藥物的增溶和包裹。因其具有親水性外殼及疏水性內核，適合于攜帶不同性質的藥物，因優良的生物降解特性，聚合物膠體受到密切關注。

與傳統的藥物制劑相比，納米藥物載體具有諸多優勢：可經過血液循環進入毛細血管，透過內皮細胞間隙進入病灶，被細胞以胞飲的方式吸收，提高藥物利用率；納米藥物載體粒徑較小，擁有較高的比表面積，可以包埋疏水性藥物，提高其溶解性，減少常規用藥中助溶劑的副作用；納米藥物載體經靶向基團修飾后可實現靶向給藥，減少藥劑量使用，降低副作用；可延長藥物的消除半衰期，提高藥效，降低用藥頻率。

這些載體材料經納米化處理后是否會產生毒性作用直接影響到最終納米制劑的生物安全性，也是納米材料工作者研究的重要內容之一。然而對于藥物納米制劑的生物安全性評價標準和評價方法，目前來說國際上還沒有一個統一、完善的實施辦法，對于納米粒子定量檢測的報道更是甚少。全面深入的研究納米材料，對其進行定量檢測是評價納米材料的安全性，制備納米制劑的重要前提。

常用的定量表征手段如質譜法應用比較廣泛且高效快速，但它對納米粒子的尺寸要求太過嚴格；電感耦合等離子體質譜法將ICP的高溫電離的特性和質譜儀的快速靈敏掃描的優勢結合，可以同時測定很多種元素，分析速度快且靈敏度高、檢測限低，被廣泛用于環境檢測、食品藥品分析等諸多領域，但存在質譜干擾、基體效應等問題；氣相色譜-電感耦合等離子體質譜法的樣品傳輸率非常高，在不消除溶劑效應的情況下仍可獲得很低的檢出限和較高的回收率，不過此方法適用于易揮發的樣品，使用范圍較窄；電化學分析法的儀器設備簡單，價格低廉，操作簡單，但其穩定性差，靈敏度低，試劑有一定的毒性；這些傳統的方法對未能很好的實現定量檢測納米材料的目的。

發明內容

為解決上述問題，本發明提供了一種PSI-OAm-NAPI兩親聚合納米材料的定量檢測方法，即基于二抗的放大作用檢測PSI-OAm-NAPI兩親聚合納米材料的免疫分析方法。PSI-OAm-NAPI兩親聚合納米材料(MFAP)通過聚琥珀酰亞胺(PSI)、N-(3-氨基丙基)咪唑(NAPI)和油胺(OAm)共同作用得到，并使用間接競爭酶聯免疫分析法實現對PSI-OAm-NAPI兩親聚合納米材料的定量檢測，該法通過在抗原抗體(一抗)特異性結合的基礎上加入酶標二抗使其與抗原一抗的復合物結合，特異性進一步加強，并將免疫學反應中抗原抗體的高特異性和酶催化反應的專一性相結合，并通過酶促反應的放大作用來提高免疫反應的信號，提高了實驗分析的靈敏度，該方法特異性強、靈敏度高，是一種快速、簡便的高通量測定方法。

本發明采取的技術方案為：

一種PSI-OAm-NAPI兩親聚合納米材料的定量檢測方法，所述方法包括以下步驟：