[發(fā)明專利]一種快速篩選穩(wěn)定高效苯酚降解嗜鹽菌的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710488741.2 | 申請日： | 2017-06-23 |
| 公開（公告）號： | CN107325981B | 公開（公告）日： | 2020-07-17 |
| 發(fā)明（設計）人： | 許繼飛;趙吉;宋曉雪;武琳慧;劉崎峰;李靜泉;包智華 | 申請（專利權）人： | 內(nèi)蒙古大學 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;C12N1/02;C02F3/34;A62D3/02;C02F101/34;A62D101/28 |
| 代理公司： | 北京路浩知識產(chǎn)權代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君;陳征 |
| 地址： | 010021 內(nèi)蒙古自*** | 國省代碼： | 內(nèi)蒙古;15 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 快速 篩選 穩(wěn)定 高效 苯酚 降解 嗜鹽菌 方法 | ||
1.一種快速篩選穩(wěn)定高效苯酚降解嗜鹽菌的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)將采集的嗜鹽菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，富集菌體后取菌液于固體平板培養(yǎng)基涂抹均勻后培養(yǎng)，獲得平板單菌落；
(2)將單菌落再次在固體平板培養(yǎng)基上連續(xù)劃線，培養(yǎng)，得到純培養(yǎng)的嗜鹽菌株；
(3)將純培養(yǎng)的嗜鹽菌株接入含有苯酚的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)；之后再取菌液接種于新的含有苯酚的液體培養(yǎng)基，如此反復5-8次；
其中，步驟(1)的液體培養(yǎng)基其1L的配方為：10g MgSO4·7H2O、0.2g CaCl2·2H2O、2-5gKCl、1-2.5g胰蛋白胨、5-10g酵母提取物、NaCl 5％-20％、H2O補至1L,pH為7.2±0.3；步驟(1)的固體平板培養(yǎng)基其配方為：按質(zhì)量體積比向上述液體培養(yǎng)基加入2％的瓊脂；
步驟(3)中所述的液體培養(yǎng)基其1L的配方為：NaCl 30-150g、Tris 1.0-5.0g、KCl 0.5-4.0g、KNO3 0.3-3g、NH4Cl 1-5g、MgSO4·7H2O 10-40g、MnSO4·H2O 0.2-1.0g、CaCl2 0.2-1.0g、葡萄糖0.5-5g，H2O 補至1L；含有苯酚的液體培養(yǎng)基，其制備方法為：向上述75-95ml液體培養(yǎng)基中加入0.05mol/L Na2HPO4 1-5ml、0.01mol/L FeSO4 1-5ml、10mg/mL酵母提取物1-5ml、10mg/mL胰蛋白胨1-5ml、10mg/mL苯酚1-5ml。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)條件為：20-40℃，100-300rpm；固體平板培養(yǎng)基培養(yǎng)條件為20-40℃。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)的培養(yǎng)條件為20-40℃，100-300rpm。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟(3)的培養(yǎng)條件為28℃，150rpm。
5.權利要求1-4任一所述的方法在環(huán)境保護中的應用。
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