[發(fā)明專利]一種促進(jìn)紅系分化的新分子USP12及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710488329.0
• 申請(qǐng)日: 2017-06-23
• 公開（公告）號(hào): CN107460172A
• 公開（公告）日: 2017-12-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉靜;彭元亮;梁龍;朱澤森;蕭小鵑;陳慧勇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中南大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N5/10
• 分類號(hào): C12N5/10;C12N15/11
• 代理公司: 北京知本村知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所11039
• 代理人: 劉江良

1.一種促K562細(xì)胞向紅系分化的方法，其特征在于，在所述的細(xì)胞中過表達(dá)USP12。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，通過過表達(dá)USP12后，進(jìn)一步聯(lián)合Hemin誘導(dǎo)所述細(xì)胞能更有效的促進(jìn)其向紅系分化。

3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所采用的檢測方法主要包括聯(lián)苯胺染色、qRT-PCR和Western blot檢測細(xì)胞血紅蛋白表達(dá)情況。

4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述qRT-PCR使用引物如下：

其中GAPDH用作內(nèi)對(duì)照。

5.如權(quán)利要求3所述的檢測方法，其特征在于所述qRT-PCR反應(yīng)體系如下：

6.如權(quán)利要求3所述的檢測方法，其特征在于所述qRT-PCR反應(yīng)程序如下：

7.一種用于誘導(dǎo)慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株K562細(xì)胞分化的試劑盒，其包括的引物的序列如下：

USP12重組引物 正向：GATAAGAGCCCGGGCGGATCCATGGAAATCCTAATGACAGTCTC

USP12重組引物 反向：GTCGACGGTATCGATCCCAAGCTTTCAGTCCCGAGACTGATAGA

USP12qPCR引物 正向：CCACCAATCCAGACAGAATGTA

USP12qPCR引物 反向：GTCGTCATCAAACAACAACCAA

其中USP12重組引物用于構(gòu)建USP12過表達(dá)載體，USP12qPCR引物用于檢測USP12的表達(dá)，其在紅系發(fā)育過程中的表達(dá)逐步上調(diào)。

8.USP12在制備慢性粒細(xì)胞白血病中的治劑中的應(yīng)用。