[發明專利]用于基因分型檢測α+缺失型地中海貧血的引物組及試劑盒

在審

• 申請號: 201710486950.3
• 申請日: 2017-06-23
• 公開（公告）號: CN109112203A
• 公開（公告）日: 2019-01-01
• 發明（設計）人: 陳治中;卿吉琳
• 申請（專利權）人: 陳治中
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 北京海虹嘉誠知識產權代理有限公司 11129
• 代理人: 向群

本發明提供一種用于基因分型檢測α⁺缺失型地中海貧血的引物組及試劑盒，屬于分子生物學領域。所述引物組包括如下引物對：上下游引物序列分別如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的3.7F/3.7R；上下游引物序列分別如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3所示的DPAIC?F/DPAIC?R；上下游引物序列分別如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示的4.2F/4.2R。采用本發明的引物組和試劑盒檢測α⁺缺失型地中海貧血，結果準確、直觀，具有較高的特異性，成本低、易于推廣。

技術領域

本發明屬于分子生物學醫藥領域，具體涉及一種用于基因分型檢測α⁺缺失型地中海貧血的引物組及試劑盒。

背景技術

地中海貧血是(簡稱地貧)是世界上最常見的血液系統遺傳病之一，呈現常染色體隱性遺傳規律。主要分為α地中海貧血(α-地貧)和β地中海貧血(β-地貧)兩類，分別由于α-珠蛋白基因或β-珠蛋白基因缺失、突變等缺陷引起對應的珠蛋白鏈的合成受到抑制或其功能喪失所致。該病高發于從地中海沿岸的意大利、希臘、馬耳他、塞浦路斯到東南亞各國的廣大地區。我國南方也是本病的高發地區，在廣西、廣東，α-地貧基因的人群攜帶率分別高達17.55％.8.53％。由于α-地貧具有普遍性、人口基數大、涉及范圍廣等特點，包括我國南方在內的重癥地中海貧血患兒的出生是世界公認的公共健康衛生問題。

正常情況下，人類珠蛋白基因所表達的α和β珠蛋白鏈之間保持適當比例(1:1)，形成具有功能的血紅蛋白四聚體，極少或沒有剩余的α-鏈或β-鏈。當珠蛋白基因在體內發生缺失、突變等基因缺陷時，致使血紅蛋白四聚體中的珠蛋白肽鏈一種或幾種合成缺乏或減少，而引起體內血紅蛋白α-鏈與β-鏈比例失衡，進而導致血紅蛋白不穩定，冗余的珠蛋白鏈沉積在紅細胞膜上，紅細胞膜的通透性和脆性發生改變，導致溶血性貧血，臨床上表現出癥狀輕重不一的慢性進行性溶血性貧血。臨床上，將α鏈合成減少而β鏈相對過剩則歸類為α-地貧。

根據分子缺陷可將其分為:幾個核苷酸的插入與缺失或單個堿基替換的非缺失型α-地貧和大片段基因的缺失型α-地貧兩大類。而就一個單倍體而言，根據α-珠蛋白合成減少的程度，α-地貧可為兩類缺陷:α⁰地中海貧血(α-地中海貧血1)，特點為α-珠蛋白膚鏈合成完全受阻，缺失兩個α基因(__/αα)；α⁰地貧基因具有明顯的地理分布與種族特征，我國最常見的為--^SEA，少見--^THAI，而--^FIL則更罕見；②α⁺地中海貧血(α地中海貧2)，表現為α-珠蛋白膚鏈合成部分受阻，通常缺失一個α基因或一個α基因發生點突變或少數幾個堿基的缺失或插入引起(-α/，α^Tα)，我國最常見的α⁺地貧基因為-α^3.7、-α^4.2缺失型突變以及Hb WS,Hb QS與Hb CS等點突變。

α-地貧是典型的基因缺失型遺傳病，研究資料表明95％以上的α-地貧是由于α-珠蛋白基因大片斷缺失(缺失型)所致,其缺失數目是α-地中海貧血臨床表現及分型的依據。根據臨床表現又將其分為靜止型(-α/αα,α^Tα/αα)、標準型(--/αα,-α/-α,α^Tα/α^Tα,-α/α^Tα)、血紅蛋白H病(--/α^Tα、--/-α)與Hb Bart's水腫胎兒綜合征(--/--)四類。其中臨床癥狀最重的為Hb Bart's水腫胎兒綜合征，患兒通常不能存活；其次為血紅蛋白H病(HbH)，其臨床表現往往輕重不一，通常非缺失型HbH病人的臨床表現往往比缺失型HbH病人更為嚴重。目前該病尚無理想的治療方法，研究表明在地貧高發區，對夫婦雙方均為地貧基因攜帶者的孕婦在妊娠早期篩查或中期應用相應分析技術通過遺傳篩查和產前基因診斷選擇性地淘汰重癥α-地貧胎兒則是控制該病發生的首要途徑和有效預防措施。因此，對于α⁺地貧的檢測急需一種簡單、能快速準確基因分型的技術手段。