[發明專利]一種用于檢測α地中海貧血的基因芯片、擴增試劑及試劑盒

在審

• 申請號: 201710485206.1
• 申請日: 2017-06-23
• 公開（公告）號: CN109112200A
• 公開（公告）日: 2019-01-01
• 發明（設計）人: 陳治中;卿吉琳
• 申請（專利權）人: 陳治中
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883
• 代理公司: 北京海虹嘉誠知識產權代理有限公司 11129
• 代理人: 吳泳歷

本發明“用于檢測α?地中海貧血的基因芯片、擴增試劑和試劑盒”，屬于分子診斷技術，利用直接PCR(Direct PCR)結合雜交(RDB)技術快速同時檢測α?地中海貧血3種非缺失型(α^CSα、α^QSα、α^WSα)及4種缺失型(??^SEA、??^THAI、?α^4.2和?α^3.7)。

技術領域

本發明涉及α-地中海貧血的分子檢測技術，特別是涉及一種利用直接PCR(DirectPCR)結合雜交(RDB)技術快速同時檢測α-地中海貧血3種非缺失型(α^CSα、α^QSα、α^WSα)及4種缺失型(--^SEA、--^THAI、-α^4.2和-α^3.7)試劑盒。

背景技術

地中海貧血(thalassemia,簡稱地貧)，是由于珠蛋白基因的缺陷(基因突變或缺失)使血紅蛋白(hemoglobin，Hb)的珠蛋白肽鏈有一種或幾種合成減少或不能合成，而引起血紅蛋白的α-鏈/非α-鏈比例失衡，進而導致血紅蛋白不穩定、紅細胞破壞，血紅蛋白產量減少所引起的一組全球最常見嚴重威脅人類健康的致死、致殘的遺傳性血液病。以α和β地中海貧血為主要類型。

α-地中海貧血(以下簡稱α-地貧)，其分子基礎是位于16號染色體短臂末端16p13.3位點上的α珠蛋白基因簇的先天性遺傳缺陷，根據基因的缺失或突變情況及臨床表現嚴重程度，可將α地貧分為靜止型(-α/αα)、輕型(標準型，--/αα或-α/-α)、中間型(HbH病，--/-α或--/α^Tα)和重型(Hb Bart's胎兒水腫綜合征，--/--)4種類型。α-地貧主要由于一條染色體上1個或同時2個α珠蛋白基因缺失引起、少部分由非缺失型突變引起的。如果缺失型α-地貧是由于缺失一條染色體上兩個功能性α-基因的其中一個，則α珠蛋白鏈的合成部分受抑制，例如亞洲人群中最常見的-α^4.2與-α^3.7；如果兩個功能性α基因全部缺失，例如東南亞人群中最常見的--^SEA以及--^THAI，則α珠蛋白鏈的合成部分更受抑制。--^SEA自身或--^THAI自身或與-α^3.7或-α^4.2相互共同遺傳可引起致死性的Hb Bart's胎兒或嚴重影響生命質量的HbH病。東南亞型(--^SEA)的純合子(--^SEA/--^SEA)與泰國型(--^THAI/--^THAI)或者東南亞復合泰國型(--^SEA/--^THAI)，由于其4個α珠蛋白基因均缺失或缺陷，以致完全無α鏈生成，在胎兒期即發生大量γ鏈合成γ4(Hb Bart′s)，Hb Bart′s對氧的親合力極高，造成組織缺氧而引起胎兒水腫綜合征，胎兒常于30～40周時流產、死胎或娩出后半小時內死亡。當夫婦雙方均為α地貧基因缺失攜帶者時，其后代有25％的機會罹患Hb Bart's或HbH病。HbH病患者臨床表現為中間型，可以中至重度貧血，甚至喪失勞動力，嚴重影響生存與生活質量；Hb Bart's水腫胎受累患兒因嚴重缺氧而胎死腹中或一出生即死亡，而引起的產科并發癥給產婦帶來極大的身心傷害；這些都給家庭和社會造成巨大壓力。在中國，目前已報道至少6種非缺失型α-地貧基因突變，其中WS、QS和CS三種點突變是最常見突變，在地中海貧血發病率最高的廣西有45.8-53.3％的Hb H病患者攜帶上述非缺失型α地貧基因，并且這類病人比那些缺失3個α珠蛋白基因所表現出更嚴重的臨床癥狀，貧血也更嚴重。

目前對地貧尚無有效的治療方法，因此通過婚檢及產前篩查等途徑進行大規模的人群篩查和診斷，發現攜帶地貧基因的夫妻，在妊娠早期進行產前基因診斷，對產前診斷為中重型地貧的胎兒進行有效干預和終止妊娠，是防止中重型地貧兒出生、提高出生人口素質的有效措施。