[發(fā)明專利]一種用于檢測(cè)α地中海貧血的基因芯片、擴(kuò)增試劑及試劑盒

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710485206.1
• 申請(qǐng)日: 2017-06-23
• 公開（公告）號(hào): CN109112200A
• 公開（公告）日: 2019-01-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳治中;卿吉琳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 陳治中
• 主分類號(hào): C12Q1/6883
• 分類號(hào): C12Q1/6883
• 代理公司: 北京海虹嘉誠知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11129
• 代理人: 吳泳歷

1.一種用于檢測(cè)α-地中海貧血的基因芯片，其特征在于，所述芯片上固定有：

用于檢測(cè)3種非缺失型α-地中海貧血基因α^CSα、α^QSα、α^WSα所對(duì)應(yīng)的探針，其堿基序列如SEQ ID NO：11-16所示；和/或

用于檢測(cè)4種缺失型α-地中海貧血基因--^SEA、--^THAI、-α^4.2和-α^3.7的探針，其堿基序列如SEQ ID NO：17-20所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基因芯片，其特征在于，所述芯片上還固定有

陰性對(duì)照探針(NC)，其堿基序列如SEQIDNO：21，

陽性對(duì)照探針(AC)，其堿基序列如SEQIDNO：22，

顯色體系控制探針(CC)，其堿基序列如SEQIDNO：23。

3.一種用于PCR檢測(cè)非缺失α-地中海非貧血基因的擴(kuò)增試劑，其特征在于：包括如下核苷酸序列的引物組：

APF：SEQ ID NO.1，

APR：SEQ ID NO.2；

其擴(kuò)增的特征序列與權(quán)利要求1或2所述的基因芯片中的用于檢測(cè)三種非缺失型α-地中海貧血基因α^CSα、α^QSα、α^WSα所對(duì)應(yīng)的探針特異性結(jié)合；

所述擴(kuò)增試劑中加入其它PCR擴(kuò)增組分，通過一次PCR反應(yīng)對(duì)待測(cè)樣品或提取自待測(cè)樣品的DNA直接進(jìn)行三種非缺失α-地中海貧基因QS、CS、WS；

所述待測(cè)樣品選自新鮮采集的抗凝外周血、-20℃－-80℃保存未反復(fù)凍融的陳舊性抗凝外周血、培養(yǎng)羊水細(xì)胞、絨毛、羊水、臍帶血、末梢血、DBS樣本和/或類似DBS處理的樣本、唾液、胚胎的遺傳物質(zhì)包括配子如精子或卵子、卵裂期胚胎的卵裂球、囊胚滋養(yǎng)外胚層細(xì)胞，即囊胚細(xì)胞、多個(gè)細(xì)胞或單個(gè)細(xì)胞等。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的擴(kuò)增試劑，其特征在于，用于一個(gè)反應(yīng)的所述PCR擴(kuò)增試劑中，含有:

5.一種用于PCR檢測(cè)缺失型α-地中海非貧血基因的擴(kuò)增試劑，其特征在于：包含如下核苷酸序列的引物組：

SEAF:SEQ ID NO.3

SEAR:SEQ ID NO.4

THAIF:SEQ ID NO.5

THAIR:SEQ ID NO.6

4.2F:SEQ ID NO.7

4.2R:SEQ ID NO.8

3.7F:SEQ ID NO.9

3.7R:SEQ ID NO.10

其擴(kuò)增的特征序列與權(quán)利要求1或2所述的基因芯片中的用于檢測(cè)四種缺失型α-地中海貧血基因--^SEA、--^THAI、-α^4.2和-α^3.7所對(duì)應(yīng)的探針特異性結(jié)合；

所述擴(kuò)增試劑中加入其它PCR擴(kuò)增組分，通過一次PCR反應(yīng)對(duì)待測(cè)樣品或提取自待測(cè)樣品的DNA直接進(jìn)行4種缺失α-地中海貧基因--^SEA、--^THAI、-α^4.2和-α^3.7-地中海貧血基因的檢測(cè)，所述待測(cè)樣品選自新鮮采集的抗凝外周血、-20℃－-80℃保存未反復(fù)凍融的陳舊性抗凝外周血、培養(yǎng)羊水細(xì)胞、絨毛、羊水、臍帶血、末梢血、DBS樣本和/或類似DBS處理的樣本、唾液、胚胎的遺傳物質(zhì)包括配子如精子或卵子、卵裂期胚胎的卵裂球、囊胚滋養(yǎng)外胚層細(xì)胞，即囊胚細(xì)胞、多個(gè)細(xì)胞或單個(gè)細(xì)胞等。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的擴(kuò)增試劑，其特征在于，用于一個(gè)反應(yīng)的所述PCR擴(kuò)增試劑中，含有:

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的擴(kuò)增試劑，其特征在于，所述引物組各引物摩爾濃度比例如下：

優(yōu)選的，用于一個(gè)反應(yīng)的所述PCR擴(kuò)增試劑中，含有: