[發(fā)明專利]一種分析油溶性抗氧化劑在乳液中抗氧化能力的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710482531.2
• 申請(qǐng)日: 2017-06-22
• 公開（公告）號(hào): CN107315000B
• 公開（公告）日: 2019-09-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李衛(wèi);張科;袁江蘭;陳燕雨
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖北工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/75
• 分類號(hào): G01N21/75;G01N21/33
• 代理公司: 武漢科皓知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 彭勁松

本發(fā)明公開了一種分析油溶性抗氧化劑在乳液中抗氧化能力的方法。屬于物質(zhì)抗氧化活性的測(cè)定方法領(lǐng)域。本發(fā)明采用偶氮異丁氰基甲酰胺替代偶氮二異丁基脒鹽酸鹽來加速乳液中的脂質(zhì)氧化，其引發(fā)形成的自由基主要位于水油界面處，有利于油溶性抗氧化劑發(fā)揮作用。在真實(shí)的水包油乳液中脂質(zhì)氧化通常發(fā)生在水油界面處而不是水相或油相，因此采用偶氮異丁氰基甲酰胺引發(fā)劑能更好地反映抗氧化劑在真實(shí)水包油乳液中的抗氧化行為。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于物質(zhì)抗氧化活性的測(cè)定方法領(lǐng)域，具體涉及偶氮異丁氰基甲酰胺在測(cè)定水包油乳液中油溶性抗氧化劑的抗氧化能力的應(yīng)用。

背景技術(shù)

目前分析抗氧化劑在水包油乳液中抗氧化能力的通用方法是采用偶氮二異丁基脒鹽酸鹽來加速乳液中的脂質(zhì)氧化，然后用紫外分光光度法進(jìn)行測(cè)定。由于偶氮二異丁基脒鹽酸鹽是一種水溶性引發(fā)劑，其引發(fā)產(chǎn)生的過氧化自由基大多位于水相，因此僅能較好地反映水溶性抗氧化劑的抗氧化能力，對(duì)于油溶性抗氧化劑會(huì)導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果偏低。

偶氮異丁氰基甲酰胺是一種比較特殊的引發(fā)劑，因?yàn)樗呐嫉獌啥说慕Y(jié)構(gòu)是不對(duì)稱的，它既是油溶性的，也是水溶性的。目前，還未見將偶氮異丁氰基甲酰胺用于乳液中油溶性抗氧化劑的抗氧化能力檢測(cè)的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

為克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，本發(fā)明采用偶氮異丁氰基甲酰胺替代偶氮二異丁基脒鹽酸鹽來加速水包油乳液中的脂質(zhì)氧化，其引發(fā)形成的自由基主要位于水油界面處，有利于油溶性抗氧化劑發(fā)揮作用，此外在真實(shí)的水包油乳液中脂質(zhì)氧化通常發(fā)生在水油界面處而不是水相或油相，因此能夠較好地反映油溶性抗氧化劑在真實(shí)水包油乳液中的抗氧化能力。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種分析油溶性抗氧化劑在水包油乳液中抗氧化能力的方法，其包括以下步驟：

1）、將50毫升濃度為30-40μM的十二烷基聚乙二醇醚（Brij35）磷酸鹽緩沖溶液（pH7.2）加入到裝有10-15mg桐油（不含維生素E）的燒杯中，用均質(zhì)機(jī)在6000-8000轉(zhuǎn)／分下均質(zhì)1-2分鐘，然后于10℃、10000G下離心5-10分鐘，即可獲得水包油桐油乳液；

2）、將50毫升濃度為30-40μM的Brij35磷酸鹽緩沖溶液（pH7.2）加入到裝有5-15mg中鏈甘油三酯的燒杯中，在6000-8000轉(zhuǎn)／分下均質(zhì)1-2分鐘，然后于10℃、10000G下離心5-10分鐘，即可獲得水包油中鏈甘油三酯乳液；

3）、將一定量的偶氮異丁氰基甲酰胺加入到步驟2）獲得的中鏈甘油三酯乳液中，混合均勻， 獲得偶氮異丁氰基甲酰胺濃度為6-10mM的中鏈甘油三酯乳液；取此中鏈甘油三酯乳液50毫升，將其與250μL步驟1）獲得的桐油乳液混合，然后加入一定濃度待測(cè)抗氧化劑磷酸鹽緩沖溶液（pH7.2）或標(biāo)準(zhǔn)抗氧化劑磷酸鹽緩沖溶液（pH7.2），混合均勻，每隔5-15分鐘用紫外分光光度計(jì)測(cè)量該混合液在273nm處的吸光度；

4）、待測(cè)抗氧化劑的抗氧化值的計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)抗氧化劑6-羥基-2,5,7,8-四甲基色烷-2-羧酸(Trolox)作為抗氧化劑參照物，按以下公式換算成待測(cè)抗氧化劑的抗氧化值，

抗氧化值 = [(U_S-U_C)/(U_Trolox-U_C)]/(Q_Trolox/Q_S)

即每摩爾（或每克）待測(cè)物質(zhì)（抗氧化劑）相當(dāng)于多少摩爾（或克）Trolox的抗氧化能力；

其中，U_S ，U_C ，U_Trolox分別代表待測(cè)抗氧化劑、空白樣、Trolox的相對(duì)吸光度之和；Q_Trolox和Q_S分別代表Trolox和待測(cè)抗氧化劑的質(zhì)量（摩爾或克）；