[發明專利]一種兩段式補料發酵合成微生物油脂的方法

在審

• 申請號: 201710476271.8
• 申請日: 2017-06-21
• 公開（公告）號: CN107435055A
• 公開（公告）日: 2017-12-05
• 發明（設計）人: 費強;傅容湛;尚龍安
• 申請（專利權）人: 西安交通大學
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司61200
• 代理人: 王艾華

1.一種兩段補料式發酵合成微生物油脂的方法，其特征在于：制備方法如下：

(1)：首先在發酵培養基中加入20-50g/L的糖作為碳源，然后接入淺白隱球菌種子液于發酵培養基中并在發酵罐中進行發酵培養，控制發酵罐的攪拌轉速為100-900轉/分鐘，以0.5-1.5vvm的流量將無菌空氣連續通入發酵罐內，并保持溶解氧濃度在10-40％，發酵溫度為20-30℃，并調節pH為5.0-7.0；隨時監控發酵過程中溶解氧濃度、pH值和碳源濃度的變化；

(2)：當溶解氧濃度和pH值同時迅速上升且糖濃度為1-5g/L時，開始流加揮發性脂肪酸混合液代替糖作為碳源；同時，利用不含氮的堿性溶液來調節pH值，并停止補加氯化銨和其它含氮物質，使發酵液中的氮含量逐漸降低至0.01g/L，造成發酵液中氮源供給不足實現氮限制，每當揮發性脂肪酸混合液濃度為1.0-5.0g/L時，流加揮發性脂肪酸混合液直至碳源總濃度在5-20g/L，微生物會將發酵液中的揮發性脂肪酸通過代謝合成轉化為生物油脂。

2.根據權利要求1所述的兩段補料式發酵合成微生物油脂的方法，其特征在于：所述的發酵培養基組成和配比為：每升發酵培養基中含糖20-50g,KH2P04 2-5g,NH4Cl 1-5g，MgS04·7H20 0.5-3g，FeCl3·6H2O 5-20mg，ZnS04·7H20 2-10mg。

3.根據權利要求1所述的兩段補料式發酵合成微生物油脂的方法，其特征在于：上述的糖為葡萄糖或蔗糖。

4.根據權利要求1所述的兩段補料式發酵合成微生物油脂的方法，其特征在于：上述的揮發性脂肪酸混合液的組成包括為乙酸、丙酸和丁酸。

5.根據權利要求4所述的兩段補料式發酵合成微生物油脂的方法，其特征在于：上述的揮發性脂肪酸混合液中各組分含量為0-100％的乙酸、0-100％的丙酸和0-100％的丁酸。