[發明專利]一種基于磁性介孔分子篩的nNOS-PSD-95解偶聯劑表面印記聚合物的制備方法

有效

• 申請號: 201710474123.2
• 申請日: 2017-06-21
• 公開（公告）號: CN107353372B
• 公開（公告）日: 2019-11-01
• 發明（設計）人: 陳立娜;黃姣姣;孫成紅;姚丹丹;張宇;張愛霞
• 申請（專利權）人: 南京醫科大學
• 主分類號: C08F285/00
• 分類號: C08F285/00;C08F220/14;C08F220/56;C08F226/06;C08F222/38;C08F292/00;C08F230/08;C08J9/26;B01J20/26;B01J20/28
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 唐循文

一種基于磁性介孔分子篩的nNOS?PSD?95解偶聯劑表面印記聚合物的制備方法，屬于分子印記聚合物技術領域，具體步驟分為：制備核殼結構的磁性介孔分子篩；對制得的磁性介孔二氧化硅微球進行表面接枝改性；制備基于磁性介孔分子篩的nNOS?PSD?95解偶聯劑表面印記聚合物。本發明制備的基于磁性介孔分子篩的nNOS?PSD?95解偶聯劑表面印記聚合物單分散性好，比表面積大，介孔規則有序，具有優良的吸附和解吸附動力學特性，且聚合物穩定性、重現性好，為實現中藥中nNOS?PSD?95解偶聯劑的選擇性捕獲和高效篩選提供可能。

技術領域

本發明屬于分子印記聚合物技術領域，尤其涉及對ZL006具有特異性識別的磁性介孔分子篩表面印記聚合物的制備方法。

背景技術

腦梗塞(缺血性腦卒中)具有高死亡率、高致殘率、高復發率等特點，嚴重危害人類健康。腦缺血條件下，興奮性氨基酸(如谷氨酸)過度釋放，引起N-甲基-D-天門冬氨酸受體(NMDAR)過度激活，通過NMDAR-PSD-95-nNOS的途徑病理性釋放一氧化氮(NO)，從而對細胞造成嚴重損傷。研究發現，nNOS-PSD-95解偶聯劑4-(2-羥基-3,5-二氯芐胺基)-2-羥基苯甲酸(ZL006)具有明確的腦缺血保護作用(Nature Medicine 2010，16，12：1439-U123)，靶點明確，副作用小，但因其親水性較大，腦組織分布不理想，要開發成臨床治療腦梗塞藥物，還需要進一步的研究和改善。中藥是人民幾千年臨床用藥經驗的結晶，從中藥中篩選nNOS-PSD-95解偶聯劑，具有療效確切，毒副作用小，成藥性強等優點。且以阻斷nNOS與PSD-95的偶聯為靶點，從中藥中開發nNOS-PSD-95解偶聯劑的研究，尚未見報道。由于中藥成分復雜、結構多樣、干擾組分多，所以其活性成分的高效篩選迫切需要一種高選擇性，特異性的專一的現代分離檢測方法。

近來，分子印記聚合物(molecular imprinted polymers，MIPs)的發展將最有可能為我們活性篩選工作提供功能強大的最優先和高效率的選擇，MIPs為目標分子“度身制作”，對模板分子具有特異識別性，用具有目標藥效的活性分子作模板合成相應的分子印記聚合物，將其用于中藥提取物的研究，可以直接從構型多樣的組分庫中篩選到與模板分子具有相同生理活性的成分，從而避免了傳統分離提取的非特異性和低效性，大大提高了藥物篩選的效率。雖然nNOS-PSD-95解偶聯劑分子印跡聚合物的制備方法已有報道(中國專利CN201019026093.4)，但其屬于本體聚合，合成的MIPs存在“印記”容量低、位點“包埋”以及處理步驟復雜等欠缺，介孔分子篩表面印記聚合物與之相比具有獨特的優勢：(1)熱穩定性和水熱穩定性好；(2)比表面積較大，使得硅膠表面形成更多的MIPs的印記“空穴”，制備MIPs時模板分子殘留大大減少，增加了有效“印記”容量并減少了傳質阻力，具有良好的吸附和解析動力學特性；(3)規則有序的垂直孔道結構更有利于分子的吸附和釋放；(4)孔徑分布均一且大小可調；(5)表面易于接枝、化學修飾和功能化設計；(6)制備方便、粒度可控；(7)廉價和環保。

此外，本發明還引入了磁性分離(magnetic separation，MS)技術，通過磁性、介孔分子篩以及表面分子印記技術的結合，可在外磁場作用下實現對靶標物質的快速直接分離，省去了離心、過濾等繁雜的操作，加快了分離速度，有效縮短了化合物篩選的時間，為中藥活性物質的選擇性快速分離富集與檢測提供了一種新的強有力手段。

發明內容

解決的技術問題：針對中藥活性篩選的低效和繁瑣以及傳統分子印跡聚合物自身的缺點，本發明提供了一種基于磁性介孔分子篩的nNOS-PSD-95解偶聯劑表面印記聚合物的制備方法，旨在尋找活性顯著、毒副作用小的抗腦卒中候選藥物，同時為中藥活性成分的的特異性和高效篩選提供新思路和新方法。