[發明專利]一種植物細胞原生質體純化儀及純化方法

有效

• 申請號: 201710469421.2
• 申請日: 2017-06-20
• 公開（公告）號: CN107058075B
• 公開（公告）日: 2023-10-20
• 發明（設計）人: 梁峰;梁梁;劉秀花
• 申請（專利權）人: 商丘師范學院
• 主分類號: C12M1/12
• 分類號: C12M1/12;C12M1/00;C12N5/04
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223
• 代理人: 俞曉明

1.一種植物細胞原生質體純化儀，其特征在于，包括電泳池，所述電泳池內從上到下依次劃分為加樣室(1)、滴漏室(2)和電泳室(3)，所述滴漏室(2)為漏斗形狀，所述加樣室(1)與所述滴漏室(2)連通、并且所述滴漏室(2)上端與所述加樣室(1)通過濾膜(11)隔開，所述電泳室(3)的左側設置有負電極(31)，右側設置有正電極(32)，所述電泳室(3)的底部從左至右分別連通有細胞碎片收集盤(4)、原生質體收集盤(5)和葉綠體收集盤(6)，所述細胞碎片收集盤(4)位于所述滴漏室(2)的下方，所述葉綠體收集盤(6)靠近所述正電極(32)設置，所述電泳室(3)內還縱向設置有濾網(33)，所述濾網(33)位于原生質體收集盤(5)的右側壁上方。

2.根據權利要求1所述的植物細胞原生質體純化儀，其特征在于，所述濾膜(11)的孔徑φ為50-100微米。

3.根據權利要求1所述的植物細胞原生質體純化儀，其特征在于，所述濾膜(11)擱置在滴漏室(2)上端端口處。

4.根據權利要求1所述的植物細胞原生質體純化儀，其特征在于，所述濾網(33)的孔徑φ為10微米。

5.根據權利要求1所述的植物細胞原生質體純化儀，其特征在于，所述電泳室(3)的上端靠近所述正電極(32)處開設有濾網插孔，并且電泳室(3)的兩個相對的側壁上分別開設有濾網滑槽(331)，所述濾網(33)的寬度小于所述濾網插孔的長度，所述濾網(33)的厚度小于所述濾網插孔的寬度，并且所述濾網(33)的兩側與兩個濾網滑槽(331)一一對應滑動連接。

6.根據權利要求1所述的植物細胞原生質體純化儀，其特征在于，所述電泳池的外部還設置有直流電泳儀(7)，并且所述直流電泳儀(7)的負極與所述負電極(31)電連接，正極與所述正電極(32)電連接。

7.根據權利要求1所述的植物細胞原生質體純化儀，其特征在于，所述細胞碎片收集盤(4)、所述原生質體收集盤(5)和所述葉綠體收集盤(6)均可拆卸的連接在所述電泳室(3)的底部，具體結構為：所述電泳室(3)的底部從左至右分別連通有細胞碎片流通管、原生質體收流通管和葉綠體流通管，所述細胞碎片收集盤(4)的開口端與所述細胞碎片流通管底部螺接，所述原生質體收集盤(5)的開口端與所述原生質體收流通管底部螺接，所述葉綠體收集盤(6)的開口端與所述葉綠體流通管底部螺接。

8.根據權利要求7所述的植物細胞原生質體純化儀，其特征在于，所述細胞碎片收集盤(4)與所述細胞碎片流通管之間、所述原生質體收集盤(5)與所述原生質體收流通管之間，所述葉綠體收集盤(6)與所述葉綠體流通管之間均設置有密封圈。

9.根據權利要求1所述的植物細胞原生質體純化儀的純化方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1，電泳室(3)內裝滿0.5mol/L的甘露醇緩沖液，將直流電泳儀(7)的電場強度調節在1.5-5v/cm，進行電泳；

S2，電泳開始后，將制備好的原生質體混合物懸浮液按照6-12滴/分鐘的速度滴加入加樣室(1)內直至滴加完畢，然后繼續電泳30min；

S3，關閉電源，收集原生質體收集盤(5)內的原生質體。