[發明專利]一種表達溶葡球菌素基因的重組乳酸乳球菌的構建方法及應用在審
| 申請號: | 201710467704.3 | 申請日: | 2017-06-20 |
| 公開(公告)號: | CN107916244A | 公開(公告)日: | 2018-04-17 |
| 發明(設計)人: | 曹遠東;曾二生;潘烘;周華嬌;易松強 | 申請(專利權)人: | 江西嘉博生物工程有限公司 |
| 主分類號: | C12N1/21 | 分類號: | C12N1/21;C12N15/74;A23K10/18;A61K38/48;A61P31/04;C12R1/46 |
| 代理公司: | 南昌新天下專利商標代理有限公司36115 | 代理人: | 謝德珍 |
| 地址: | 332600 江西省九江*** | 國省代碼: | 江西;36 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 表達 球菌 基因 重組 乳酸 構建 方法 應用 | ||
1.一種表達溶葡球菌素基因的重組乳酸乳球菌,其特征在于,重組乳酸乳球菌為Lysostaphin-pNZ8148-NZ9000。
2.根據權利要求1所述的一種表達溶葡球菌素基因的重組乳酸乳球菌,其特征在于,包含了權利要求1所述質粒的乳酸乳球菌,所述的質粒為pNZ8148。
3.根據權利要求1所述的一種表達溶葡球菌素基因的重組乳酸乳球菌的構建方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)按照宿主菌乳酸乳球菌的密碼子偏好性進行優化而合成溶葡球菌素 (Lysostaphin )基因與乳酸乳球菌( pNZ8148)質粒;
(2)用限制性內切酶分別對溶葡球菌素 (Lysostaphin )基因與乳酸乳球菌( pNZ8148)質粒進行雙酶切,回收,再經 T4 DNA 連接酶進行連接后轉化至大腸桿菌 MC1061 感受態細胞中;
(3)使用氯霉素抗性進行篩選后,提取重組質粒并電轉至乳酸乳球菌NZ9000中,PCR 鑒定正確,得到重組乳酸乳酸球菌 Lysostaphin-pNZ8148-NZ9000;
(4)Western Blot鑒定重組乳酸乳球菌的表達結果。
4.根據權利要求1所述的一種表達溶葡球菌素基因的重組乳酸乳球菌的應用,其特征在于,所述的重組乳酸乳球菌Lysostaphin-pNZ8148-NZ9000全培養基可直接飼喂動物,既可發揮乳酸乳球菌的益生菌功效,又可發揮豬溶葡球菌素殺滅腸道內葡萄球菌,預防和治療葡萄球菌病的功效。
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