[發明專利]三七素的提取方法及其應用及三七氨基酸的提取方法

有效

• 申請號: 201710461359.2
• 申請日: 2017-06-16
• 公開（公告）號: CN107162926B
• 公開（公告）日: 2021-05-14
• 發明（設計）人: 陳彤;楊曉涵;李雙
• 申請（專利權）人: 云南多糖生物科技有限公司
• 主分類號: C07C231/24
• 分類號: C07C231/24;C07C233/56;A61K36/258;A61K31/198;A61P7/04;A61P3/02;A61K8/44;A61Q11/00
• 代理公司: 北京馳納智財知識產權代理事務所(普通合伙) 11367
• 代理人: 單晶

1.一種三七素的提取方法，由以下步驟組成：

A、三七素的粗提：取工業三七廢渣進行兩次水浸提，所述工業三七廢渣通過如下方式得到：三七經過濃度為75-80％乙醇在60-80℃的溫度下四次提取皂苷，和/或，提取皂苷過程在真空條件下進行，和/或，在提取皂苷過程中添加酸或堿來調節pH，再經過蒸汽吹渣和干燥得到，其中吹渣和干燥的操作如下：

吹渣：從多功能提取罐底部加熱廢渣，產生酒精蒸汽，冷凝酒精蒸汽，收集酒精溶液至酒精濃度為15-20％；

干燥：廢渣在太陽下暴曬至水分至9％以下，裝麻袋，當廢料丟棄；

收集并合并兩次水浸提的濾液，并將合并后的濾液進行離心，取上清液進行濃縮得濃縮液，其中，上清液濃縮采用旋轉蒸發儀進行，溫度為50℃-80℃；向濃縮液中加入乙醇，然后靜置、抽濾，得濾液，并回收抽濾得到的濾液中的乙醇，得余下的三七素粗提液；

所述兩次水浸提為：第一次水浸提是在50℃-80℃恒溫水浴提取8小時，第二次水浸提是在50℃-80℃恒溫水浴提取8小時；

濃縮液中加入3倍量的無水乙醇，然后在4℃下靜置24小時；

B、三七素粗提液鑒別：采用薄層層析法對粗提液進行鑒別，判斷所述三七素粗提液中是否含有三七素；

C、三七素的純化：步驟B中鑒別結果顯示所述三七素粗提液中含有三七素時，對三七素粗提液進行純化，得到洗脫液；其中，進行純化時，用001×7陽離子交換樹脂柱純化，流速為0.1-0.25mL/min；

D、洗脫液鑒別：采用薄層層析法對所述洗脫液進行鑒別，判斷所述洗脫液中是否含有三七素；

E、結晶：合并含有與三七素對照品有相同Rf值且只有一個斑點的洗脫液，并采用旋轉蒸發儀濃縮蒸干，加蒸餾水使其剛好完全溶解，然后加入丙酮，析出大量晶體沉淀；

F、重結晶：步驟E中得到的晶體沉淀和溶液用0.2μm微孔濾膜過濾，收集晶體沉淀，且向所述晶體沉淀加水使其剛好完全溶解得到水溶液；并采用旋轉蒸發儀濃縮蒸干，加水使其剛好完全溶解，然后加入丙酮，析出大量重結晶晶體沉淀，然后用0.2μm微孔濾膜過濾，收集重結晶晶體沉淀并加水使其剛好完全溶解，得到三七素水溶液；

G、三七素水溶液的鑒別；采用薄層層析法進行檢測；

H、步驟G中檢測結果顯示為所述三七素水溶液僅有一個斑點且與三七素對照品有相同Rf值，將所述三七素水溶液進行冷凍干燥，得到三七素供試品；所述冷凍干燥的操作為：

(1)、預凍：-40℃預凍12h；

(2)、冷凍：在真空度為0.05-0.07MBar、溫度為-49±1℃條件下，凍存38h。

2.如權利要求1所述的三七素提取方法，其特征在于：第一次水浸提，工業廢渣中加入6-10倍量的蒸餾水。

3.如權利要求2所述的三七素提取方法，其特征在于：第二次水浸提，第一次水浸提的濾渣中加入3-5倍量的蒸餾水。

4.如權利要求3所述的三七素提取方法，其特征在于：步驟A中，收集兩次水浸提的濾液的操作為：將兩次水浸提溶液采用紗布粗濾，再將紗布粗濾得到的濾渣用離心機分離，傾倒上清液，得兩次水浸提的濾液。

5.如權利要求4所述的三七素提取方法，其特征在于：步驟A中，取上清液濃縮至所述上清液體積的1/5，得濃縮液。

6.如權利要求5所述的三七素提取方法，其特征在于：步驟A中，所述抽濾采用化學分析濾紙，真空度為0.06-0.08MPa。

7.如權利要求6所述的三七素提取方法，其特征在于：回收抽濾得到的濾液中的乙醇時，采用旋轉蒸發儀，溫度為50-80℃。

8.如權利要求7所述的三七素提取方法，其特征在于：步驟B中，判定三七素粗提液中不存在三七素時，更換工業三七廢渣重新進行步驟A。

9.如權利要求8所述的三七素提取方法，其特征在于：步驟C中，所述對三七素粗提液進行純化時，采用001×7陽離子交換樹脂柱。