[發(fā)明專利]一種大黃魚干擾素調(diào)節(jié)因子IRF3啟動子、核酸構(gòu)建體、細(xì)胞及其制備方法和用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710457836.8
• 申請日: 2017-06-16
• 公開（公告）號: CN107058326B
• 公開（公告）日: 2019-11-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄒鵬飛;李瑩;姚翠鸞;張晴;孫慶學(xué)
• 申請（專利權(quán)）人: 集美大學(xué);廈門大學(xué)嘉庚學(xué)院
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/11;C12N15/10;C12N15/85;A01K67/027
• 代理公司: 35218 廈門市精誠新創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 姜成康<國際申請>=<國際公布>=<進(jìn)入

1.一種大黃魚干擾素調(diào)節(jié)因子IRF3啟動子，其特征在于，其核苷酸序列如Seq ID No.1所示，或者為與Seq ID No.1互補(bǔ)的核苷酸序列。

2.一種核酸構(gòu)建體，包含權(quán)利要求1所述的IRF3啟動子，與IRF3啟動子可操作連接的基因序列，其中所述IRF3啟動子與所述基因序列來源相同或者不同。

3.一種載體，其特征在于：所述載體含有權(quán)利要求1所述的IRF3啟動子或權(quán)利要求2所述的核酸構(gòu)建體。

4.權(quán)利要求3的載體，其特征在于：所述載體為權(quán)利要求1所述的IRF3啟動子或權(quán)利要求2所述的核酸構(gòu)建體與真核表達(dá)載體經(jīng)重組得到的重組載體。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的載體，其特征在于，所述真核表達(dá)載體為pGL4.17質(zhì)粒。

6.一種重組細(xì)胞，其特征在于：所述細(xì)胞含有權(quán)利要求1所述的IRF3啟動子或權(quán)利要求2所述的核酸構(gòu)建體或權(quán)利要求3或4所述的載體，所述重組細(xì)胞為魚類細(xì)胞。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述重組細(xì)胞，其特征在于，所述魚類細(xì)胞為EPC細(xì)胞。

8.一組引物對，所述引物對用于擴(kuò)增得到權(quán)利要求1所述的IRF3啟動子，其特征在于：所述引物對的兩條引物為Seq ID No：4和Seq ID No：5所示的序列。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述引物對，其特征在于，所述引物對的兩條引物在Seq ID No：4和Seq ID No：5所示序列的5’端還分別連接有限制性酶切位點(diǎn)和/或保護(hù)堿基。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述引物對，其特征在于，所述引物對的兩條引物分別為Seq IDNo：2和Seq ID No：3所示的序列。

11.一種制備SEQ ID NO：1所述的IRF3啟動子的方法，包括

以大黃魚基因組DNA為模板，使用一對擴(kuò)增引物進(jìn)行擴(kuò)增，所述擴(kuò)增引物根據(jù)SEQ IDNO：1在大黃魚基因組DNA中的序列分別針對首尾進(jìn)行設(shè)計(jì)。

12.權(quán)利要求11的方法，其特征在于，所述擴(kuò)增引物為權(quán)利要求8-10任一所述的引物對。

13.一種調(diào)控大黃魚類中高效表達(dá)外源基因的方法，所述方法包括，將權(quán)利要求1所述的啟動子或權(quán)利要求2所述的核酸構(gòu)建體或權(quán)利要求3-5任一所述的載體或權(quán)利要求6或7所述的重組細(xì)胞導(dǎo)入大黃魚。

14.權(quán)利要求1所述的啟動子、或權(quán)利要求2所述的核酸構(gòu)建體、或者權(quán)利要求3-5任一所述的載體在調(diào)控目的基因表達(dá)或制備轉(zhuǎn)基因魚中的用途，所述魚類為大黃魚。